求大神帮忙看看双染法测凋亡的补偿设得对么

椴树 · 发表于 2013-4-29 21:00:57

001：双阴性 002：单染，003单染，004阴性对照后面都是实验组了这些数据可靠么

椴树 · 发表于 2013-4-29 21:05:34

操作的老师说从双阴性来看她给我调的电压是可以的但是从后面的图看电压调太低了细胞都趴在x轴上了还说我染的不好，annexin V-FITC单染强度不行，说是已经把我的荧光补偿调很高了不能在调了我用的是BD的试剂盒 RT染了15min 然后补加200ul binding buffer 滤网然后上流式的是我染色时间不够么还有这个为什么染色后不用洗的啊？

niwanmao · 发表于 2013-4-29 21:32:15

FL2也就是PI的电压还需要增高，不过对结果分析影响不大，只是图不太好看而已。

这几个结果可以用，但是联系十字门可以适当右移，不一定按照单染设置坐标，因为单染的荧光偏低的。

椴树 · 发表于 2013-4-29 21:41:14

niwanmao 发表于 2013-4-29 21:32

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FL2也就是PI的电压还需要增高，不过对结果分析影响不大，只是图不太好看而已。

这几个结果可以用，但是联 ...

好的谢谢老师可是为什么她说我染得不好呢我看了另外一个跟我用同一试剂盒的同学她的FITC单染的对照，LR象限细胞百分比比我的多她染了1h。

椴树 · 发表于 2013-4-29 21:43:28

niwanmao 发表于 2013-4-29 21:32

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FL2也就是PI的电压还需要增高，不过对结果分析影响不大，只是图不太好看而已。

这几个结果可以用，但是联 ...

十字门右移的话那结果会不会变呢？会不会右边象限的细胞百分比都下降了呢？还是没有关系呢？

niwanmao · 发表于 2013-4-30 09:30:05

椴树发表于 2013-4-29 21:41

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好的谢谢老师可是为什么她说我染得不好呢我看了另外一个跟我用同一试剂盒的同学她的FITC单染的对照， ...

细胞不同，处理不同，凋亡肯定有差异，即使同一个细胞，不同人处理也有可能做得不一样。

niwanmao · 发表于 2013-4-30 09:32:40

椴树发表于 2013-4-29 21:43

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十字门右移的话那结果会不会变呢？会不会右边象限的细胞百分比都下降了呢？还是没有关系呢？ ...

十字门右移是因为现在的位置不正确，所以需要适当右移至分群分界处，不能按照单染设，单染只是作为电压和补偿设置参考

椴树 · 发表于 2013-4-30 10:53:45

niwanmao 发表于 2013-4-30 09:32

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十字门右移是因为现在的位置不正确，所以需要适当右移至分群分界处，不能按照单染设，单染只是作为电压和 ...

谢谢您，您说的分群处是不是右移到10的2次方右边一格就可以了，这样的话，我现在的数据是不是凋亡率比实际偏高了呢?还有设门的话是根据双阴性的细胞设么？

niwanmao · 发表于 2013-4-30 14:43:31

椴树发表于 2013-04-30 10:53:45

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谢谢您，您说的分群处是不是右移到10的2次方右边一格就可以了，这样的话，我现在的数据是不是凋亡率比实

是的

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