NK细胞杀伤靶细胞丢失

20071271 · 发表于 2013-5-9 10:33:34

亲爱的FLOWER，加入流式中文网，一起讨论，一起学习，享受更多福利吧！

您需要登录才可以下载或查看，没有账号？加入流式中文网

×

各位战友好
我做自然杀伤细胞杀伤活力检测。我将靶细胞调整好浓度后，平均分装到各孔，然后按照不同的效应细胞/靶细胞（E：T）比加入效应细胞。全部吸干，检测。发现：随着效靶比升高，收集到的靶细胞（CFSE+）有逐渐减少的趋势，特别是在从40:1到80:1时，从10000减少到5000左右。使细胞杀伤活性低于预期。
靶细胞我用CFDA-SE染色，与效应细胞共培养后，PI染色。
各位战友，帮我分析分析。这是什么情况

20071271 · 发表于 2013-5-9 10:38:14

本帖最后由 20071271 于 2013-5-9 10:39 编辑

我做了几次试验，都是这样。Q2+Q3=CFSE+

niwanmao · 发表于 2013-5-9 13:17:26

20071271 发表于 2013-5-9 10:38

登录/注册后可看大图

我做了几次试验，都是这样。Q2+Q3=CFSE+

没有图吗？

20071271 · 发表于 2013-5-9 14:04:11

数据和图。有图，求真相

niwanmao · 发表于 2013-5-9 15:09:14

20071271 发表于 2013-5-9 14:04

登录/注册后可看大图

数据和图。有图，求真相

这个实验我没有亲自做过，没法说出你的问题所在，不过从这篇产品说明书上所述：https://www.caymanchem.com/pdfs/600120.pdf
第11页，是不是应该从靶细胞的活力、NK细胞的活力上找原因？

20071271 · 发表于 2013-5-9 17:52:46

同样的靶细胞，同样的效应细胞，不应该出现这种问题

niwanmao · 发表于 2013-5-9 18:32:05

20071271 发表于 2013-5-9 17:52

登录/注册后可看大图

同样的靶细胞，同样的效应细胞，不应该出现这种问题

意思是假如你的效应细胞杀伤作用弱，那么可能就杀不死靶细胞，因此靶细胞很少死亡。

20071271 · 发表于 2013-5-9 21:22:32

niwanmao 发表于 2013-5-9 18:32

登录/注册后可看大图

意思是假如你的效应细胞杀伤作用弱，那么可能就杀不死靶细胞，因此靶细胞很少死亡。 ...

如果活性不够，杀不死靶细胞，那靶细胞就能检测到（至少它们的膜完整，而且染了色）。

niwanmao · 发表于 2013-5-9 22:03:40

20071271 发表于 2013-5-9 21:22

登录/注册后可看大图

如果活性不够，杀不死靶细胞，那靶细胞就能检测到（至少它们的膜完整，而且染了色）。 ...

你用什么靶细胞？

20071271 · 发表于 2013-5-10 09:29:35

niwanmao 发表于 2013-5-9 22:03

登录/注册后可看大图

你用什么靶细胞？

yac-1小鼠淋巴瘤

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[功能检测] NK细胞杀伤靶细胞丢失

亲爱的FLOWER，加入流式中文网，一起讨论，一起学习，享受更多福利吧！