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有些流式细胞术实验可能对荧光强度的数值没有非常精确的要求，但有些实验就需要不同的时间、不同的机器之间能实现标准化对比。为此，BD Biosciences在2012年3月份出了一份技术文档，利用 FACSDiva V6的“Application Settings”以实现在不同机器、不同时间实验之间的数值标准化。
注：不知道coulter的各个机型之间是否有类似方案可以实施？至于其它公司，我个人觉得流式细胞仪型号少，可能需求不是很大。
这个protocol主要的步骤：
1、运行Cytometer Setup and Tracking (CS&T) 软件，用 CS&T beads做初始的质控。
2、用细胞或目的颗粒微调：用阴性细胞确定最小PMT电压，确定标准是计算阴性细胞rSD大约为质控中rSDEN（electronic noise robust standard deviation）（见图1）的2.5倍左右。用强阳性细胞确定合适的PMT电压，必须使高表达的细胞荧光强度在质控报告linearity max channel数值（见图1）以内，最好离max值稍远一点，以确保以后实际检测时一些极端高表达的数据也能显示出来。
CS&T质控报告
图1. CS&T质控报告
3、保存application settings。在Browser窗口中打开experiment，在其中的cytometer settings点击右键，save或export均可。要应用application settings，就点击apply就可以了。
＝＝＝＝质控指标科普链接＝＝＝＝
BD流式细胞仪 - 检测性能评测(Qr, Br)
流式细胞仪的灵敏度和分辨率视频讲解
＝＝＝＝详细步骤请参见下面的技术手册（英文）＝＝＝＝＝
BD_FACSDiva_Stndrd_App_Setup_TechBulletin.pdf
(492.02 KB, 下载次数: 26)
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发表于 2013-5-22 11:41:23
发表于 2013-6-15 20:59:59
