哪位高手指点一下兔子外周血白细胞的淋巴分群分析

dragonhzqsmmu

各位老师，我近期做了一次兔子外周血白细胞的淋巴分群分析，使用的是自配的裂红液，处理全血后感觉还有些红细胞残留，但FSC/SSC进行淋巴分群，总感觉不是很理想，想请教各位老师有谁做过这个的，因为兔子相关的流式细胞抗体比较少，想先看看分群效果再往后面处理
一共试了两个条件，具体的机器条件我明天去单位抄一下，左边的是伪色图，右边的是对应的斑马线图


问题如下：

1）FSC/SSC感觉单核细胞有点靠左了，是调整电压还是后面的GAIN?

2）裂红不完全会影响淋巴分群吗？

两个条件下细胞分群设门

niwanmao

分群挺好的啊。不需要调整单核位置。
红细胞裂解液一般不会影响淋巴细胞分群。

Amiskeiv

我做过豚鼠的，相对于豚鼠裂红后WBC用FSC/SSC分，你这已经很清楚了。
试着回答下你的问题，新手，仅供参考。

裂解后残留的少量红细胞不怎么影响后续的实验，裂解时间可以放长一些，之后小心用枪（对是枪不是吸管）把上边红色部分吸掉。

豚鼠的淋巴细胞单用FSC/SSC也是分的不好，后来我在文献中看到有人用SSC\一抗体，WBC亚群可以分的更好一些，你看看兔子有没有相关的文献。

以上仅供参考。

didi_zhou

如果不需要做细胞计数，可以裂红以后洗一次（离心、PBS重悬），这样影响会小很多。

dragonhzqsmmu

didi_zhou 发表于 2013-6-24 21:20

                               
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如果不需要做细胞计数，可以裂红以后洗一次（离心、PBS重悬），这样影响会小很多。 ...

经验之谈，多谢啦

赤道与北极

楼主好，有兔子抗体相关信息吗，可以分享一下兔子抗体哪家的吗？想做一个关于兔的流式实验，一直没找到合适流式抗体，谢谢

niwanmao

赤道与北极 发表于 2023-3-1 09:57
楼主好，有兔子抗体相关信息吗，可以分享一下兔子抗体哪家的吗？想做一个关于兔的流式实验，一直没找到合适 ...

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赤道与北极

niwanmao 发表于 2023-3-1 11:05
已在另一个帖子中回复

谢谢，倪老师