流式细胞术定量检测Beclin-1表达

niwanmao

流式细胞术可高效、快速、多参数检测单细胞的各类指标，Beclin-1蛋白是监测自噬的一个重要指标，然而以前一直都是用免疫组化或Western blot等方法检测，流式则很少应用。本文就是研究流式细胞术定量检测Beclin-1的方法学及其优化，并用3-甲基腺嘌呤检测Beclin-1的抑制情况。用免疫组化方法验证，发现两种方法完全一致。
优化情况如下：

• 用2％牛血清白蛋白/PBS阻断非特异性染色；
• Beclin-1一抗(Mouse Anti-Rat Beclin-1 Monoclonal Antibody 0.004ug/ul. Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz. CA, USA)，室温孵育30分钟；
• 制备的标本可保存在4℃ 6小时内检测，否则需要用1％多聚甲醛固定保存在4℃，需在3天内检测。
  

Beclin-1表达情况

dragonhzqsmmu

学习一下，多谢老师

feng238926

倪老师，流式在定量方面前景怎么样？

niwanmao

feng238926 发表于 2018-11-5 16:53
倪老师，流式在定量方面前景怎么样？

极好。