效应记忆T细胞的流式标记问题

dragonhzqsmmu

近期想尝试效应记忆T细胞的流式细胞分析，但查了几篇相关的文献，都是先标记CD3，然后再标记CD4，接着联合CD45RA和CD45RO双标，从中选择CD3+CD4+CD45RA+CD45RO-和CD3+CD4+CD45RA-CD45RO+的里面看CCR7阳性群的比例

问题是我们的流式细胞只有四个通道，可否舍弃CD3，直接CD4 CD45RA CD45RO CCR7这样标记？

niwanmao

如果舍弃CD3，那么你选择的CD4信噪比一定要好，因为一些单核细胞也会表达CD4，只是强度比淋巴细胞要弱一些。如果信噪比不高，可能会造成单核和T淋巴细胞的CD4区分不开。

我建议你还是用CD3，舍弃 CD4更靠谱。

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2013-10-11 11:44

                               
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如果舍弃CD3，那么你选择的CD4信噪比一定要好，因为一些单核细胞也会表达CD4，只是强度比淋巴细胞要弱一些 ...

谢谢您的建议，但那样会不会把CD8+的细胞也算进来？

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-10-11 12:11:12

                               
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谢谢您的建议，但那样会不会把CD8+的细胞也算进来？

这肯定要包括进去的，没有办法。如果你要把CD4和CD8区分开来，那四色肯定不够。

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2013-10-11 13:01

                               
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这肯定要包括进去的，没有办法。如果你要把CD4和CD8区分开来，那四色肯定不够。 ...

在BD公司的官网上看到这张图，是否可以这样处理：
CD3 CD4 CD45RA CD197一管
CD3 CD8 CD45RA CD197一管，分别看CD4和CD8的Tem和Tcm？

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-10-11 17:58

                               
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在BD公司的官网上看到这张图，是否可以这样处理：
CD3 CD4 CD45RA CD197一管
CD3 CD8 CD45RA CD197一管， ...

如果要求不高，是可以。如果需要计算很精确，还是得CD45RA、CD45RO双标，看下面这个图就知道了，大概有6％的细胞位于双阳性或双阴性区域。

王风

niwanmao 发表于 2013-10-11 19:13
如果要求不高，是可以。如果需要计算很精确，还是得CD45RA、CD45RO双标，看下面这个图就知道了，大概有6 ...

倪老师  请问下这种CD45RACD45RO双阳和双阴的细胞是什么类型的呢？

niwanmao

王风 发表于 2020-10-8 18:10
倪老师  请问下这种CD45RACD45RO双阳和双阴的细胞是什么类型的呢？

暂时未看到过相关文献描述，无法给出明确意见

王风

niwanmao 发表于 2020-10-9 15:00
暂时未看到过相关文献描述，无法给出明确意见

谢谢倪老师  我也查了文献问过一堆人都没有说法 我测出来了一群超明显的双阴。。。。。

niwanmao

王风 发表于 2020-10-9 15:25
谢谢倪老师  我也查了文献问过一堆人都没有说法 我测出来了一群超明显的双阴。。。。。 ...

特别多的话，不太会吧，如果确实是明显的双阴性，可以追踪一下，必要时分选出来，做基因或功能学验证。搞不好能发现什么新的东西。