流式检测Treg细胞

zxxfighting · 发表于 2014-4-7 09:19:10

各位老师，我刚开始接触流式，最近检测的人外周血CD4+CD25+CD127loFoxp3+Treg细胞的表型中，发现CD4的阳性率比CD127的阳性率都还要高，并且CD4的阳性率才20%多一点。我用的是ebioscience的抗体，不知道这是什么原因？

此外，Treg和Th17细胞的各个表型的阳性率的大概范围是多少呢？求解答

niwanmao · 发表于 2014-4-7 10:08:30

1、CD4＋的比例20％似乎还是可以接受的，不知道你的图形是怎么样的，如有可能是否能上传？
2、Treg的比例参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3075-1-1.html， Th17的比例似乎还没看到。

zxxfighting · 发表于 2014-4-7 22:07:15

niwanmao 发表于 2014-4-7 10:08
1、CD4＋的比例20％似乎还是可以接受的，不知道你的图形是怎么样的，如有可能是否能上传？
2、Treg的比例参 ...

我还没有做完，只做了部分单染

niwanmao · 发表于 2014-4-8 09:05:22

zxxfighting 发表于 2014-4-7 22:07
我还没有做完，只做了部分单染

哦，用C6做的。这个FSC/SSC散点图似乎有点奇怪，你圈的R1会不会是单核细胞？

zxxfighting · 发表于 2014-4-8 09:38:55

niwanmao 发表于 2014-4-8 09:05
哦，用C6做的。这个FSC/SSC散点图似乎有点奇怪，你圈的R1会不会是单核细胞？ ...

这个我也不是很清楚，是老师帮我做的。
会不会是目的区域放大的不够，淋巴细胞的亚群还没有出来呢？

niwanmao · 发表于 2014-4-8 19:15:33

zxxfighting 发表于 2014-4-8 09:38
这个我也不是很清楚，是老师帮我做的。
会不会是目的区域放大的不够，淋巴细胞的亚群还没有出来呢？ ...

放大是够的，但是圈门似乎有问题，一方面圈的太大，另一方面现在仔细想想，似乎T细胞比例很低，不知道附近的单核混进去了？另外，这个外周血标本是正常人还是病人的？

zxxfighting · 发表于 2014-4-9 08:20:39

niwanmao 发表于 2014-4-8 19:15
放大是够的，但是圈门似乎有问题，一方面圈的太大，另一方面现在仔细想想，似乎T细胞比例很低，不知道附 ...

是正常人的

美猫秀秀 · 发表于 2014-4-17 21:15:38

倪老师这是我检测的treg，似乎没染上。能帮我看看是什么问题么？谢谢

小灰 · 发表于 2014-4-17 21:46:22

如果你是分的PBMC做的，R1肯定不对，似乎是SSC电压太高。
如果你是CD3抗体加白介素刺激培养过的细胞，那这个图就差不多可以了。
你发上来的图有加逻辑关系了吗？怎么三个都是R1出来的单阳性？

小灰 · 发表于 2014-4-17 21:50:07

临床上来讲，CD4绝对计数小于200，可诊断为艾滋病。其余的值都算正常，并不能说明什么问题。CD4/CD8比值用来评估人的免疫水平，才有一定临床意义

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