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在网上看到美天旎新推出的REAfinity新一代流式抗体,好奇之余点击进去,发现确实还是有点意思,至少解决了几个目前流式单抗的痛点(同型对照难选、经常需阻断Fc片段非特异性结合),故在此总结推荐给大家,不作为广告,仅为分享。
=====分享内容的分割线======= Recombinant Engineered Antibody重组基因工程改造抗体,与传统大鼠、小鼠单克隆抗体相比优势明显:
- 优选序列:挑选最佳克隆号的抗体,以该抗体序列作为改造的基础,所以REAfinity抗体亲和力更高、特异性更好;
- 无需Fc受体阻断剂:REAfinity™ 抗体的Fc段经基因突变改造,去除了Fcγ受体结合段,对Fc受体几乎不产生非特异性结合;(图1)
- 通用型同型对照:所有的REAfinity抗体都是人IgG1亚型;因此,对于200种REA克隆号的所有抗体来说,只需一种同型对照,命名为REA Control Antibodies或clone REA293。根据抗原表达位置不同,该通用型同型对照抗体分为膜表面型和胞内型两类。无需花费心思寻找合适的同型对照抗体。
- 纯度高:基因工程重组、哺乳动物细胞表达,严格控制,表达出的抗体只有单一的IgG重链和轻链类型,纯度高,无批次间差异;(图2)
- 染色指数高: REAfinity抗体本身背景值低、抗体与荧光素结合的优良工艺,二者保证了抗体的高染色指数。
图1
图1:REAfinity抗体对FcR几乎无非特异结合。在不使用FcR 阻断剂的情况下,小鼠单抗染色有很高的非特异性染色,背景值非常高(A),因此,用小鼠单抗染色前有必要使用FcR阻断剂处理(B)。而用REAfinity抗体时,不经FcR阻断剂处理,即可检测到CD158a+ 细胞,特异性非常好(C)。
图2
图2:质谱分析小鼠单抗和REAfinity 抗体。A:小鼠单抗有混杂的几种重链和轻链。B:REAfinity抗体只有单一种类的重链(50 kDa)和轻链(24 kDa)。
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