用天津灏洋的FICOLL液分离PBMC的问题

Kimbryant

倪老师，您用过天津灏洋的ficoll分离液吗？分人血时我是血：PBS：ficoll=1:1:1,360g30min,看不见明显的白膜层，ficolll里面有颗粒或絮状的白色东西，请问是不是我离心力太大了，时间长了

niwanmao

我们平时都做全血，没用FICOLL分离过。你要么用不同的离心速度试试，摸摸条件看。或者直接联系他们厂家，让他们提供技术支持。

mylive

这个我们经常做，离心转心通常设置为2500rpm,20min,升速或降速均不能太快，如果有10档设置为3-5档就可以，个人觉得分离液里有颗粒或絮状的白色东西，跟标本有关系

Kimbryant

mylive 发表于 2014-11-18 08:16
这个我们经常做，离心转心通常设置为2500rpm,20min,升速或降速均不能太快，如果有10档设置为3-5档就可以， ...

2500转是多少G

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-11-18 18:00
2500转是多少G

如何换算看这里，注意搜索：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-207-1-1.html

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-11-18 19:53
如何换算看这里，注意搜索：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-207-1-1.html

他没说半径

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-11-18 20:03
他没说半径

半径要你自己去量离心机的啊，rpm与半径无关，g和半径有关。

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-11-18 20:03
半径要你自己去量离心机的啊，rpm与半径无关，g和半径有关。

他说2500转，我想知道他的半径多少，然后就知道G了，我离心机半径跟他可能不一样啊

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-11-18 20:08
他说2500转，我想知道他的半径多少，然后就知道G了，我离心机半径跟他可能不一样啊 ...

你怎么没理解，他说的2500转就是2500rpm，这个数字是与半径无关的，当然无需告诉你，然后你测一下你的离心机半径，就能够算出你的离心机对应的g了。

月下听蝉

rpm不同机器不一样，xg是通用的。360xg，30min是绝对没问题的。
一般分离推荐用的速度是300~400xg，40~50min，自然升降，给一点点升速度及一点点减速度（如果机器选择不了，就选择不加刹车即可，not brake），可以不给减速度（即自然减速）。楼主肯定没注意让机器尽可能自然升降。
如果比较急，也可以用800xg，30min或者1100xg，18~20min，（如果选择这两个速度，加速度要适当给大但不能过大，不然，速度还没达到800或1100，离心时间就到了）