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[标本处理] 为什么冰乙醇与多聚甲醛固定穿膜后非特异性结合特别的...

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发表于 2015-1-6 16:36:15 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
是因为洗涤不充分吗?冰乙醇与多聚甲醛固定穿膜后标记抗体,之后 是如何洗涤样品细胞去除未结合的抗体的呢?试剂,洗涤条件?
图一:bs-10498R样品冰乙醇固定后标记的,但此抗体与样品无交叉反应。
图二:bs-10211R样品多聚甲醛固定穿膜后标记的抗体,与样品特异性反应,但是同型对照也有很高的结合率。求解!!谢谢大家!!

bs-10498R, 对样品无交叉反应

bs-10498R, 对样品无交叉反应

对样品有特异性

对样品有特异性
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发表于 2015-1-6 16:52:14 | 显示全部楼层
破膜染胞内标记,还是建议用商品化破膜剂或温和的皂素。
乙醇破膜很剧烈,导致膜受损,从而发生细胞死亡或非特异性染色,没法消除。

所以出路只有一个:换破膜剂
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 楼主| 发表于 2015-1-7 08:17:01 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-1-6 16:52
破膜染胞内标记,还是建议用商品化破膜剂或温和的皂素。
乙醇破膜很剧烈,导致膜受损,从而发生细胞死亡或 ...

谢谢倪老师!
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