生存还是毁灭？谈谈流式细胞术中的生物安全问题

niwanmao

生物安全是许多科学家没有重视的事情之一，我估计，约40％的人认为生物安全有点强调过度了，40％认为要遵守生物安全，剩下20％决定不了。

不用说，我肯定是站在强调生物安全这边。
以下是原因：
美国CDC曾发布过一条新闻（链接见http://www.cdc.gov/media/releases/2014/s0619-anthrax.html）：“疾病控制中心（CDC）今天宣布约75名亚特兰大工作人员需要被监控或用抗生素治疗，因为他们因为没有遵守安全操作守则而不小心暴露于炭疽杆菌。”

是的，生物安全可以在任何地方发生，即使在这种“高级”的国家实验室。
这也很好地提醒我们，操作规程不能随意破坏，也不能因为忽视或恶意或心情不好而略过。


为什么生物安全如此重要？
生物安全首先意味着要保证你所在实验室每一个人的安全，而且生物安全保证了，实验室的领导才能安心。你看上面美国CDC的事件一出，后面肯定会采取各种各样的规章制度强制约束，并且实验室领导可能也已经更换掉了。


如何保证良好的生物安全
1、沟通。确保你与流式细胞术工作人员沟通每一步的风险以及采样要求。
2、承诺。良好的生物安全需要流式细胞术工作人员和管理人员设置合理的规则并强制执行，也要求定期修订以保证这些规章制度不过时。
3、了解你的研究所生物安全主任（IBO）。每个研究所会有负责生物安全规则制定和执行的位置，我们可以称之为研究所生物安全主任（IBO），与他们建立好良好的关系，是互惠互利的。
4、要大胆跟IBO分享流式细胞术的所有步骤，IBO了解了这些内容，会帮助你制定生物安全规则。


实行流式细胞术生物安全方案

实施时记得遵循以下好方法：
1、流式细胞术工作人员需要熟悉研究所的IBO，请他们提供一些安全指导（如果研究所没有IBO，可以考虑一些替代的保护措施）。
2、你先教IBO一些流式细胞术的处理步骤，然后让IBO教你风险评估、控制要求等。
3、可以从所有角度考虑，或利用头脑风暴，或向外部寻求帮助，以建立一套完善的措施。如果有可能，演习或测试一下，然后再回顾该措施的可行性。最后，强制执行。
4、记住流式分析的要求和检测与分选不同。


检测分析
液路，对于分析型流式细胞仪非常重要，液路是封闭的，所以细胞从管子中吸入后，经过液路就直接进入废液桶。所以，生物安全的关注点要放在样本制备和样本拿到仪器检测的过程中。重点包括：
1、细胞标本是如何从处理点转移至流式细胞仪的？
2、样本是否会在上机前固定？
3、如果没法固定，对于高风险的标本会采取什么额外措施？



细胞分选
在细胞分选中，尤其是电荷式分选，细胞流被打成液滴。大多数系统每秒钟可产生9万个甚至更多的液滴。任何一个气溶胶液滴均可能包含导致感染的某种细胞。

所以，分选的房间是高度生物危险性的（BSL2或更高级别）。
分选时一定要知道你所分选的细胞种类，分选操作者的保护非常关键。


参考文献：
Holmes, KL, et al., (2014) International society for the advancement of cytometry cell sorter biosafety standards. Cytometry A 85A;434-453.
Schmid, I. et al., (2007) International society for analytical cytology biosafety standard for sorting of unfixed cells. Cytometry A 71A:414-437.
Schmid, I, et al., (1997) Biosafety guidelines for sorting of unfixed cells. Cytometry 28:99-117.

facetodog

确实是应该提高对流式的安全控制