多色流式方案设计新手指南

niwanmao

“能力越大，越容易被滥用。” - 埃德蒙·伯克
“能力越大，责任越大。”－伏尔泰

尽管上面两句话都跟多色流式看上去没有一点关系，但是在设计和优化多色流式方案的时候，牢记这些话还是对你会有很大的帮助的。现在，多色流式的需求越来越大，因为它可以使你在一管内发现更多的细胞亚群，能够使我们解决和提出更多的生物学问题。


流式方案的设计过程是令人生畏并且费时的。因为这个原因，Cytometry A杂志出版了一个专题，叫做“Optimized Multicolor Immunofluorescent Panel”，简称OMIP。这些文章中详细提供了每个多色流式方案的细节，包括该方案要解决的问题、使用的试剂、样本分析的设门方案。目前OMIP系列已有20多篇文章，大部分都是针对T细胞免疫表型的。（流式中文网翻译了大部分protocol，见http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=collection&action=view&ctid=6）

设计你自己的多色流式方案
如果上述的OMIP中没有你想要的方案，或者方案没法解决你的问题，那就需要你自己设计了，于是艰苦的工作开始了。一步一步来吧。

游客，本帖隐藏的内容需要积分高于 50 才可浏览，您当前积分为 0

以上的步骤和原则可以帮助你设计多色流式方案，不管是4色还是14色，总结起来，就是在设计过程中需要考虑仪器、抗原表达水平、荧光素亮度、抗体分离指数等等。如果你在设计过程中有疑难，随时欢迎来流式中文网讨论（http://www.flowcyto.cn）

Susan

现在beckman coulter 公司正在测试一种8色的 B cell panel, 大概是CD45/5/kappa/lambda/10/19/20/23,不知道中国市场有没有引进。用这个配好的cocktail panel, 就不用再重复实验补偿调色了。

niwanmao

Susan 发表于 2015-2-11 18:44
现在beckman coulter 公司正在测试一种8色的 B cell panel, 大概是CD45/5/kappa/lambda/10/19/20/23,不知道 ...

嗯，他们在欧洲有个one study的十色panel似乎也准备引进。这些标准化的panel配合对应机型 ，会使实验减少很多麻烦。