骨髓瘤残留检测问题

FCMao

我做的骨髓瘤残留五色和六色方案结果不同，第一次遇到这种情况。以前对比过结果没太大差异。


五色方案 56-FITC 138-PE 45-PB 38-APC 19-PEvio770做出来有两群浆细胞分别是138+38str+45+19+56-的正常浆细胞和138+38dim+45-19-56+的异常浆细胞，五色方案里这两群细胞的比例相当估计各占有核的0.05%~0.06%


六色方案cLambda-FITC cKappa-PE 45-PB 19-PEvio770 56-APC 38-APC-Cy7 做出来只有正常浆细胞138+38str+45+19+56-ckappa+cLambda+的浆细胞估计占有核细胞的0.04%，异常的就是45-的几乎没有，非常少肯定不到0.01%。

不知道什么原因，以前没有这种现象，六色每次在做之前都经PBS洗两遍防止非特异性吸附，难道是洗掉了一部分浆细胞吗？以前也是同样的操作呀。在45和38图里五色方案明显看到两群38+和CD38dim+的PC，而6色方案只有一群。

niwanmao

FCMao 发表于 2015-3-11 20:19
谢谢倪老师。我以前做的很多例，因为怕结果不稳定，都同时做了五色和六色，六色因为洗涤有细胞损失，所以 ...

一般做残留，建议还是做表面标记是最好的，因为最稳定，细胞经过的处理步骤少，不容易被破坏。

FCMao

@niwanmao 倪老师帮我看看，感激不尽

niwanmao

胞内染色容易不稳定，特别是本来MRD就低的时候，这时两个不同方案，再加上胞内染色，对不上就很正常了。

FCMao

niwanmao 发表于 2015-3-11 20:07
胞内染色容易不稳定，特别是本来MRD就低的时候，这时两个不同方案，再加上胞内染色，对不上就很正常了。 ...

谢谢倪老师。我以前做的很多例，因为怕结果不稳定，都同时做了五色和六色，六色因为洗涤有细胞损失，所以PC比例上略少，但就像现在这种情况，有一群丢失真的没遇到过，这该如何解决呢？是否需要重新做一次六色。