请问各位老师，在做周期时被空白对照只染色51%，有什么.....

marshlin

各位老师好，

请问在做周期分析时，没有任何处理的细胞只有51%被染色，这正常吗？我见多数文献要到90%左右，有什么办法改进？有文献报道加Triton-100，不知道是否可行？有没有人做过加Triton-100的方法，请不吝赐教！谢谢

niwanmao

protocol站内有：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1330-1-1.html

你这不是51％被染色，而是指碎片太多，正常细胞只有51％。

marshlin

谢谢老师，但镜下观察细胞状态是很好，MTT检测细胞活性也跟之前实验结果是一样的。
有没可能是细胞太大，乙醇固定的效果不够还是怎么回事？

niwanmao

marshlin 发表于 2015-3-27 17:52
谢谢老师，但镜下观察细胞状态是很好，MTT检测细胞活性也跟之前实验结果是一样的。
有没可能是细胞太大，乙 ...

碎片区域的信号主要有两种可能：
1、细胞碎片
2、仪器液路脏

显微镜下观察细胞状态好，那应该是乙醇固定之前的吧？乙醇固定以后的呢？不过这类碎片区域可以通过提高阈值来排除掉，对你的结果影响也不大。

marshlin

niwanmao 发表于 2015-3-28 09:31
碎片区域的信号主要有两种可能：
1、细胞碎片
2、仪器液路脏

谢谢老师，一、有可能是管路脏；二、提高阈值固然可以。
另外下次我固定后再在显微镜下观察一下细胞是否完整。