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过继免疫治疗已用于治疗很多类型的癌症，而树突状细胞（DC）可诱导、调节这种免疫反应，因此逐渐成为肿瘤疫苗的佐剂。DC是一种强力的抗原递呈细胞，可识别、处理递呈外来抗原至T细胞。
在临床制备疫苗时，通常需要数百万的DC作为佐剂。DC本来就存在于外周血，但是外周血DC浓度非常低，所以收集外周血DC是不实际的。因此，通常用造血干细胞或外周血单核细胞来制备DC。
DC来源最常见的就是外周血单个核细胞（PBMC）。大量的PBMC通过白细胞分离术收集，并通过粘附、淘洗、免疫磁珠分选等方式，进一步纯化。这些单核细胞用GM-CSF和IL-4刺激后可生成DC，不过此时的DC是静止或未成熟的，被称为iDC。有些过继性免疫治疗使用iDC，但是，现在成熟DC（mDC）使用却越来越多了，因为与iDC相比，mDC表达更高水平的共刺激分子，产生更多的细胞因子，刺激细胞毒T细胞的能力更强。
mDC有以下特征：
高表达共刺激分子CD80、CD83、CD86、CCL21等
产生白介素-12p70（IL-12p70）的能力强，该因子是促使Th1反应的主要因子。
DC成熟可通过炎症信号如肿瘤坏死因子（TNF）、白介素-1 beta（IL-1 beta）或细菌衍生物（如LPS），双链RNA、干扰素、前列腺素也可以诱导DC成熟。
常规的DC成熟诱导组合是IL-1 beta、IL-6、TNF-alpha和前列腺素E2，这种组合成熟的mDC虽然共刺激分子和迁移功能很强，但是IL-12表达水平低，因此有些人会加上IL-12p70。
但在临床上，现在主要用LPS和IFN-gamma组合。本文是发表在2009年J Immunother.上的文章，作者比较了LPS＋IFN-gamma、LPS＋IFN-gamma＋IL-1 beta、LPS＋IFN-gamma＋IL-1 beta＋TNF-alpha这三组在诱导mDC成熟上的效率，主要指标有：
ELISA法检测IL-12p70和IL-10的因子水平；
流式细胞术检测HLA-DR和CD80、CD83、CD86表达水平；
mDC的基因表达谱。
下表是三个组合诱导DC成熟共刺激分子的变化：
DC成熟时共刺激分子的变化
最后发现三组没有显著性差异。说明临床上只要用LPS＋IFN-gamma诱导DC成熟即可。
通过本文，其实大家可以从中学习到：
DC诱导成熟的方法学；
DC诱导成熟的指标检测；
流式细胞术检测DC成熟的指标及其变动程度。
点击下面图标开始全文在线阅读（免费，耐心等待加载）：
https://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=Nzc3NXw5YjAzOTQ4ZHwxNzQwMzY5NzQwfDB8
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DCMaturationProtocol.pdf
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发表于 2015-3-27 16:32:12
发表于 2015-3-31 19:53:47
