同型对照很高的情况下怎样区分阳性细胞群

天微微亮

各位老师，你们好！最近在看王建中老师的书里面有讲述到每个抗体的同型范围和标本峰的范围，但我发现有些抗体的同型对照和标本峰重叠，这是什么情况？

CD212

CD309

CD163

niwanmao

天微微亮 发表于 2015-4-28 10:30
倪老师，请问能提供抗原丰度相关链接吗？

目前似乎没有一个完整和明确的抗原丰度排行，应该说，在抗体厂家的说明书上，大概可以看出在什么细胞上表达丰度如何，这是一个比较好的参考。

niwanmao

这种都是发生抗原表达强度弱的情况，这些抗原丰度低，所以荧光强度弱。

天微微亮

niwanmao 发表于 2015-3-31 08:53
这种都是发生抗原表达强度弱的情况，这些抗原丰度低，所以荧光强度弱。

谢谢倪老师，我不明白的是以2图VEGFR-2这个抗体为例，我们的标本本身是弱表达，但是选用PE这种荧光信号强的染料，PE染料本身的信噪比是305，但是为什么它阴性和阳性区分不开？是非特异结合很高的意思吗？

niwanmao

天微微亮 发表于 2015-3-31 10:25
谢谢倪老师，我不明白的是以2图VEGFR-2这个抗体为例，我们的标本本身是弱表达，但是选用PE这种荧光信号强 ...

以前有几篇资料中提到过，对于抗体的表达，除了与荧光素强度有关，跟抗原本身的丰度相关密切，你可以想象成荧光素是一盏灯，抗原是一个人，一个人举着500瓦的灯和100个人举着100瓦的灯，看上去哪个更亮？

天微微亮

niwanmao 发表于 2015-3-31 11:00
以前有几篇资料中提到过，对于抗体的表达，除了与荧光素强度有关，跟抗原本身的丰度相关密切，你可以想象 ...

这样子，果然生动，谢谢倪老师。

zhang4083

天微微亮 发表于 2015-4-3 09:13
这样子，果然生动，谢谢倪老师。

我怎么就没有理解倪老师说的比喻呢？
难道是我太笨了。
你在给细致的解释一下。

爱白衣杀手

天微微亮 发表于 2015-4-3 09:13
这样子，果然生动，谢谢倪老师。

是的，我也没懂倪老师的比喻。。。

culturelily

爱白衣杀手 发表于 2015-4-6 23:11
是的，我也没懂倪老师的比喻。。。

ISOTYPE不会跟抗原结合，但是抗体会。

ddn111

我觉得还有另外一点，抗体本身不行，N多商用抗体或来源于科研单位，或难以得到，针对某些表位的几个单抗不见得结合特性很好，科研上勉强能用而已。借用倪老师的比喻，500w的灯如果照脚，比不上100W的灯照着头吧！