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做组化的一抗,可不可以做间接法流式?

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发表于 2010-8-1 20:43:02 | 显示全部楼层 |阅读模式

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标题:做组化的一抗,可不可以做间接法流式?各位战友,我做组化还剩下些一抗和荧光二抗,可不可以做间接法流式啊?

回答者:niwanmao
可以试试。
部分做组化或Western blot的一抗是可以用于间接法的流式检测,但是有些不行,可能跟结合位点的位置有关,或者来源克隆有关。
2009年8月12日 0:54

回答者:niwanmao
做流式的抗体浓度是和组化不一样的,一般要高很多倍。但是如果要做到准确的浓度,最好进行抗体滴定。抗体滴定的具体步骤见:http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=290
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发表于 2010-8-3 15:52:04 | 显示全部楼层
倪老师:我一个做流式的老师说,每10的6次方个细胞要求的抗体的量就是1微克,然后再按着抗体的浓度进行换算就可以了。你看这样说对不对啊?
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 楼主| 发表于 2010-8-3 16:15:26 | 显示全部楼层

按照抗体滴定的理论,跟反应的体积也很有关系,最好是进行抗体滴定,确定能够以最低的浓度取得最好的染色效果。
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发表于 2010-9-7 00:45:18 | 显示全部楼层
看说明书,有适用范围的,一般可以,而且有推荐浓度。
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