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前两篇,向大家介绍了NK、NKT、γδT细胞的特性:
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4317-1-1.html
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4334-1-1.html
现在通过十色流式的实例,讲解如何分析NK、NKT、γδT及其各种亚群。
第一步是排除粘连细胞和碎片:
通过前面的排除粘连细胞和碎片后,接下来根据FSC/SSC或CD45/SSC圈中淋巴细胞
CD3/CD56散点图,淋巴细胞可以分成:
1、CD3-CD56+的NK
2、CD3+CD56+的NKT
3、CD3 bright CD56+的T细胞,可能为γδT
4、CD3+CD56-的T细胞
根据CD16/CD56散点图,NK细胞可分为三群:
CD56 bright CD16 Low , CD56 bright CD16 Int ,CD56 dim CD16 bright
根据CD8/CD56散点图,NK细胞可分为五群:
CD56 bright CD8 - ,CD56 bright CD8 + ,CD56 dim CD8 - ,CD56 bright CD8 int ,CD56 dim CD8 +
根据CD62L/CD56表达,NK细胞分为三群:
CD56 bright CD62L High , CD56 dim CD62L Int ,CD56 dim CD62L -
根据CD56/CD57表达,NK细胞分为三群:
CD56 bright CD57 - ,CD56 dim CD57 - , CD56 dim CD57 +
CD38是重要的信号分子,所有NK细胞均表达CD38。CD69是NK细胞活化分子之一,少数NK表达CD69。
NK细胞的NCR受体分析
T细胞的CD45RA和CD62L分析
NK细胞的CD94分群
NK细胞的NKG2D、NKG2A分析
NK细胞的KIR分析
iNKT分析
iNKT约占外周血的0.005~0.006%,占淋巴细胞的0.2%
γδT的CD8、CD4表达
γδT的CD16表达
γδT的NCR表达
γδT的TCR gamma/delta表达
γδT的KIR表达
γδT的CD45RA、CD45RO、CD62L表达
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