MSC数据中CD14和CD34呈弱阳性，求解

chymanhz · 发表于 2015-4-16 18:25:12

各位大侠有没有做过间充质干细胞，我这边做的时候用的是BD的试剂，包括79a,14,90,105,73,45,34,HLA-DR. 其实都没有问题，就是CD14和CD34弱阳性，我用了BD的仪器以及acea的仪器都有这个问题，同时我用不同的样本染色问题还是存在，我想问下里面有什么讲究。试验就是MSC直接加5ul试剂，15分钟避光孵育然后上机。

chymanhz · 发表于 2015-4-16 18:30:28

ACEA NovoCyte的数据

chymanhz · 发表于 2015-4-16 18:31:16

control为未染色间充质干细胞

niwanmao · 发表于 2015-4-16 21:03:12

抗体有没有滴定？此外，你们这个msc标本是不是培养过的？

chymanhz · 发表于 2015-4-17 09:31:30

谢谢倪老师，抗体没有滴定，说明书是10ul，10ul和5ul都试过了，结果差异不大。MSC是培养过的。

niwanmao · 发表于 2015-4-17 20:23:13

chymanhz 发表于 2015-4-17 09:31
谢谢倪老师，抗体没有滴定，说明书是10ul，10ul和5ul都试过了，结果差异不大。MSC是培养过的。 ...

嗯，可能跟培养有关系，有些细胞经过培养后，由于代谢物增加或颗粒增多，导致抗原表达会发生非特异性增强，你们要么试试新分离的MSC表达看。（2023-12-4纠正不正确的表述，见9楼和10楼讨论，感谢wmj123456站友）

1269189831 · 发表于 2018-3-29 12:06:02

MSC表型分析，比例是直接用同型对照画门，然后叠加过来看阳性的比例吗？

1269189831 · 发表于 2018-3-29 12:07:47

我理解的是～对比平均荧光强度看是不是阳性，再通过同型对照圈门看比例～

wmj123456 · 发表于 2023-12-4 10:26:02

niwanmao 发表于 2015-4-17 20:23
嗯，可能跟培养有关系，有些细胞经过培养后，抗原表达会发生丢失。你们要么试试新分离的MSC表达看。 ...

倪老师，您是推测CD34弱阳性，是由于培养中抗原表达丢失的原因？不太理解啊，如果培养中抗原表达丢失，不是应该是CD34阴性吗？但是里面是CD34产生了假阳性。

niwanmao · 发表于 2023-12-4 20:22:46

wmj123456 发表于 2023-12-4 10:26
倪老师，您是推测CD34弱阳性，是由于培养中抗原表达丢失的原因？不太理解啊，如果培养中抗原表达丢失，不 ...

咦，这是8年前的帖子，看到你的回复，我想了又想，已经想不起当初的思维了。

如果换成现在去回答，我会考虑培养后产生的培养后细胞内颗粒增多或代谢物增多，导致非特异性荧光增强了。

估计当时这样回答的最大可能是把楼主所说的标记看反成降低了，也不知道当初是咋想的，哈哈，实在抱歉，我对楼上那帖子做个补充，避免其它人踩坑。谢谢

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