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标题：请问做CD4+CD25+CD127LowTreg的详细操作步骤 niwanmao老师您好!
由于购买成套的CD4+CD25+CD127LowTreg试剂盒很贵,所以单买三个抗体及相应的同型对照,其中FITC-CD4,PE-CY7CD25购自BD公司,PE-CD127购自ebioscience公司,进行三色分析,(注我们的流式细胞仪是三色的)不知这样搭配行吗?
我想做外周血的Treg,即先用淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞后,再做Treg实验,可我是新手,以前没接触过流式操作,因此想问问用提取好的淋巴细胞做Treg的详细操作步骤,请niwanmao老师帮我解决下这两个问题,不胜感激!! 回答者：niwanmao llhlz1971，您好。
1、如果你的流式机型支持这三种染料，这样的搭配是可以的。
2、淋巴细胞不需要分离，因为在分析时通过FSC-SSC两个参数，可以把淋巴细胞圈出来。当然，如果用Ficoll分也没问题。
分析步骤如下：
- 画Dot Plot，横坐标FSC，纵坐标SSC。圈出淋巴细胞，设为R1。
- 画Dot Plot，横坐标CD4，纵坐标FSC，将Gate设为R1，圈出CD4、CD25双阳性的细胞，设为R2。
- 画Dot Plot，横坐标为CD25，纵坐标CD127，将Gate设为R1 AND R2，圈出CD25+CD127low细胞，即为Treg的比例。
2009年8月12日 0:54 | 
发表于 2010-8-1 20:44:32
发表于 2019-5-27 20:40:08
