FMO对照和同型对照，你用对了吗？

niwanmao

昨天的帖子中（http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4404-1-1.html）提到了，同型对照主要是反映抗体的非特异性结合背景，并且介绍了同型对照选择的几个关键因素，同时也顺便提及FMO对照。FMO对照主要用在>4色的流式检测中，由所有抗体减去一个目标抗体组成，所以能够反映荧光渗漏引起的背景荧光，在多色流式检测中非常重要。
从以上概念我们可以看出，FMO对照和同型对照反映的是两种类型的背景荧光，所以在多色流式时，要用单独使用其中一种来设门，均不可靠。

此外，对于对照，大家问的最多的问题就是我是不是要在每次检测时都要用FMO和同型对照，这个问题的答案就是，如果资金足够，最好都用，但对于大多数情况下，标本批间差异不大时，可以只做一次。

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钢蛋儿

学习啦~~~

zj8237277

倪老师，您好！
FMO对照和同型对照反映的是两种类型的背景荧光，所以在多色流式时，要用单独使用其中一种来设门，均不可靠。
请问下，那我到底是选用哪个对照来设门呢（除生物学对照）？     谢谢！

niwanmao

zj8237277 发表于 2017-8-9 00:15
倪老师，您好！
FMO对照和同型对照反映的是两种类型的背景荧光，所以在多色流式时，要用单独使用其中一种来 ...

生物学阴性对照最佳，其次是FMO＋Fc Blocking。同型对照在多色实验中，用了Fc Blocking之后就几乎没什么意义了。

zj8237277

好的，谢谢倪老师！

lgfffancy

学习学习

小外星人

非常好，解惑了！！

luorenbu

niwanmao 发表于 2017-8-9 02:38
生物学阴性对照最佳，其次是FMO＋Fc Blocking。同型对照在多色实验中，用了Fc Blocking之后就几乎没什么 ...

倪老师您好，
为什么同型对照在用了FC block的多样品染色后意义不大？

niwanmao

luorenbu 发表于 2019-3-1 23:03
倪老师您好，
为什么同型对照在用了FC block的多样品染色后意义不大？

两者作用是一样的。同型对照是为了让我们了解由于Fc受体非特异性结合引起的背景荧光（当前，前提是同型对照挑对了，详细可搜索“同型对照”关键词），那么Fc受体阻断之后，你觉得同型对照还有必要用吗？

hellohello

老师您好，在这种情况下，由于实验条件限制没办法做生物学阴性对照实验，请问该如何画门？谢谢