细胞整体右偏，凋亡问题请教

lsj1988

做的是Annexin-v-pi与7AAD，请问我图片中的左下象限的细胞在药物刺激后整体往右偏了，请问这种右偏所得到的百分比是属于凋亡吗？通常情况下是右下与右上出现单独的一群细胞，属于早与晚凋亡。我这种整体右偏的该如何解释呢？请倪老师帮忙解答。谢谢

lsj1988

求帮助，求赐教

niwanmao

不算，你需要把门往右移。
右移的原因是因为对照组细胞没有刺激，刺激会影响背景荧光水平

zy21318302

倪老师，我最近在做annexin-v和PI的凋亡实验，发现annexin-v调补偿的时候，要调到很高才能把细胞群调下来，都快接近90了，这样调补偿数据还可信吗？新手，求请教

niwanmao

zy21318302 发表于 2015-5-27 18:00
倪老师，我最近在做annexin-v和PI的凋亡实验，发现annexin-v调补偿的时候，要调到很高才能把细胞群调下来， ...

补偿过大不是很好，但是如果分群清楚还是可以用的。

cn981

niwanmao 发表于 2015-5-16 20:53
不算，你需要把门往右移。
右移的原因是因为对照组细胞没有刺激，刺激会影响背景荧光水平
...

倪老师，你说的刺激会影响背景荧光水平，是不是和加了染料后整个细胞群会发生偏移是一个道理，这种偏移不能当成凋亡，而凋亡必须以有相对明确分群加以鉴别，我的理解对不对，请倪老师解答一下，谢谢

niwanmao

cn981 发表于 2015-7-30 23:37
倪老师，你说的刺激会影响背景荧光水平，是不是和加了染料后整个细胞群会发生偏移是一个道理，这种偏移不 ...

刺激之后，细胞会发生一些物理性质或代谢物质的改变，这些都会使背景荧光。加染料发生的假性偏移那是非特异性染色。