淋巴细胞亚群

高医生 · 发表于 2015-6-8 15:34:31

本帖最后由高医生于 2015-6-8 16:19 编辑

@niwanmao 使用流式机器是BD FACS Aria 3，想分析外周血淋巴细胞亚群，T淋巴，NK, B淋巴，应该怎么标记？现在有CD4-FITC,CD8-PERCP,CD19-PE抗体，是不是还应该标记CD-3,CD45,和CD56, 应该怎样搭配荧光呢？谢谢

niwanmao · 发表于 2015-6-8 16:31:06

粗分的话这些标记差不多。至于用什么荧光，不清楚你们仪器的激光器和滤光片配置呢。

高医生 · 发表于 2015-6-8 17:33:07

@niwanmao 如果不标CD45呢？我测的是外周血的，如果我有外周血血常规淋巴细胞绝对值，流式得到各个细胞占淋巴细胞的比例，这样得到其亚型的绝对值可以吗？

niwanmao · 发表于 2015-6-8 20:21:29

高医生发表于 2015-6-8 17:33
@niwanmao 如果不标CD45呢？我测的是外周血的，如果我有外周血血常规淋巴细胞绝对值，流式得到各个细胞占 ...

CD45标上去更容易区分，建议用。

你所说的方法是双平台法，如果有绝对计数微球，建议单平台法更靠谱。

高医生 · 发表于 2015-6-8 21:19:24

本帖最后由高医生于 2015-6-8 21:22 编辑

@niwanmao
好的，谢谢倪老师，还有一个问题，您看一下我的这个图，标的是CD4-FITC,CD8-PE,画十字门是靠上还是靠下区分CD8阳性？为什么会出现这种情况？

niwanmao · 发表于 2015-6-8 21:26:24

高医生发表于 2015-6-8 21:19
@niwanmao
好的，谢谢倪老师，还有一个问题，您看一下我的这个图，标的是CD4-FITC,CD8-PE,画十字门是 ...

应该如下图

高医生 · 发表于 2015-6-9 08:07:43

明白了，谢谢倪老师，倪老师做过人脑脊液的淋巴细胞亚群检测吗？脑脊液的单个核细胞怎么获得？@niwanmao

zhang4083 · 发表于 2015-6-9 08:12:44

高医生发表于 2015-6-9 08:07
明白了，谢谢倪老师，倪老师做过人脑脊液的淋巴细胞亚群检测吗？脑脊液的单个核细胞怎么获得？@niwanmao ...

我是没有做过，看看倪老师了。呵呵

高医生 · 发表于 2015-6-9 08:20:27

zhang4083 发表于 2015-6-9 08:12
我是没有做过，看看倪老师了。呵呵

我看文献上有人做的，直接取脑脊液离心，弃上清，重悬之后就直接加抗体进行标记了

zhang4083 · 发表于 2015-6-9 08:32:48

高医生发表于 2015-6-9 08:20
我看文献上有人做的，直接取脑脊液离心，弃上清，重悬之后就直接加抗体进行标记了 ...

如果是国内文献，可信度不大。
如果英文文章，影响因子大于5为可信度高。影响因子小于1的，可信度基本也不行。但是我感觉还是以文献为准，倪老师毕竟精力有限，不可能做那么多得实验。

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