t-cell活性检测

fm100200

新手请教：如何用流式检测细胞活性，选择什么吗抗体，如何去分析这些抗体染色的结果

小憨

你所说的活性是指增殖、凋亡、分泌细胞因子吗？

fm100200

小憨 发表于 2015-6-10 14:41
你所说的活性是指增殖、凋亡、分泌细胞因子吗？

就是想看t-cell功能的活性，应该是你说的这些吧

fm100200

小憨 发表于 2015-6-10 14:41
你所说的活性是指增殖、凋亡、分泌细胞因子吗？

用CD3CD28可以做吗

小憨

fm100200 发表于 2015-6-10 14:49
用CD3CD28可以做吗

可以，如果都用流式测的话，可以用CFSE dilution测增殖，胞内细胞因子染色检测细胞因子的分泌。
T细胞的活化可以用固相化CD3+CD28，这几种方法都是经典方法，相应的protocol也一大堆，网上搜就能找到。

来瓶4/8血

我知道的是live/dead试剂盒，适合405、488、532、561、633nm激光的流式细胞仪。

小憨

来瓶4/8血 发表于 2015-6-10 15:04
我知道的是live/dead试剂盒，适合405、488、532、561、633nm激光的流式细胞仪。

他的意思应该不是将死细胞、活细胞分开，而是要检测T细胞的免疫功能。

fm100200

小憨 发表于 2015-6-10 14:55
可以，如果都用流式测的话，可以用CFSE dilution测增殖，胞内细胞因子染色检测细胞因子的分泌。
T细胞的 ...

我们t-cell的增殖就是用CD3和cd28beads刺激的，我是不是该用cd3和cd28做

小憨

fm100200 发表于 2015-6-11 10:56
我们t-cell的增殖就是用CD3和cd28beads刺激的，我是不是该用cd3和cd28做

beads更高级啊，总之就是得用固相化的CD3、28，也就是固相化在beads上或者固相化在培养板孔底部上，这样TCR和CD28才能在一个方向上极化形成“免疫突触”，向内传导活化的第一和第二信号。

fm100200

小憨 发表于 2015-6-11 14:13
beads更高级啊，总之就是得用固相化的CD3、28，也就是固相化在beads上或者固相化在培养板孔底部上，这样T ...

我最近再看一片这样的文献  就说的是固相化CD3CD28，但是没有说如何流式检验，那请问一下，这俩种抗体我选什么颜色，上流式后如何分析，有相关文献给推荐没