传说中的“火箭峰”

cn981

这就是传说中的火箭峰吗，老是不知道如何处理，请老师帮忙分析一下原因，我做的是Annexin V-FITC和PI双染，测细胞早期凋亡，用的是日本同仁的试剂盒。细胞是成纤维细胞，后面也用了293细胞，得到的现象都差不多。下面图是用正常组的细胞做的，分别是无染色，FITC单染，PI单染，FITC+PI.

来瓶4/8血

你没标记诶，只能猜了，感觉像电压高了。

niwanmao

1.jpg是什么标本？

其它几管不知道FSC/SSC表现如何，PI的电压似乎偏低。

贴壁细胞我一直不建议做AV/PI，因为很难控制其胞膜不被破坏，对于贴壁细胞的凋亡，subG1、Caspase-3、线粒体膜电位等都是不错的选择。

cn981

倪老师，1 是无染色的FCS,和SCS散点图，这些细胞都是正常对照的，其他几官的FCS SCS图像和1 差不多。愁啊，我还用了293细胞做，结果类似，293贴壁很弱，轻轻一吹就掉了，不用消化。按理说就不应该是由于消化造成的火箭峰，始终找不到解决的办法，但是我们找了其他单位的仪器，似乎就没有火箭峰的问题，所以那天我才问题，是不是仪器本身没有校正的缘故，请倪老师有时间解答一下，谢谢

cn981

倪老师，如果我用JC-1和pe染色来监测线粒体膜电位，通过流式细胞仪检测，是否合适

niwanmao

cn981 发表于 2015-6-16 15:14
倪老师，1 是无染色的FCS,和SCS散点图，这些细胞都是正常对照的，其他几官的FCS SCS图像和1 差不多。愁啊， ...

如果其它仪器没有问题，那可能是仪器选择的通道不同吧。JC-1为什么要和PE一起染？

cn981

niwanmao 发表于 2015-6-16 18:15
如果其它仪器没有问题，那可能是仪器选择的通道不同吧。JC-1为什么要和PE一起染？
...

jc-1无需和pe一起，倪老师，我理解错了，谢谢

cn981

今天把之前在别的仪器上做的图给大家发一下，同样的细胞，同样的处理，结果很不一样，麻烦分析一下原因

cn981

这个为什么就没有火箭峰呢

niwanmao

cn981 发表于 2015-6-30 23:14
这个为什么就没有火箭峰呢

为什么你觉得这些图一定要有火箭峰呢？