串联染料真的毫无是处？就那么受人歧视吗？

niwanmao

在平时流式抗体的荧光搭配上，很多人可能都会考虑到串联染料（例如PerCP-cy5.5、PE-cy7、APC-cy7等）容易降解，而不去选择，或尽量避免。

但实际上，在日常使用中，我们发现这些串联染料还是很好使的，并不是“见光就死”的染料。只要平时保存时注意避光，加样的时候见一下弱光问题不大。

其实，串联染料的出现还有其它用途呢，请见下面这张ExCyte的总结图片，串联染料主要有几种优势：

1、使得检测红外区域的光谱成为可能。
2、串联染料扩展了斯托克斯位移，可获得单分子染料中无法实现的发射波长。
3、为每一个激光器增加了更多的选择。

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所以，有空的时候，给串联染料一点机会。

使用串联染料的注意事项和诀窍请移步：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4532-1-1.html

culturelily

可以讲讲如何避免串联染料降解，比如如何发现降解，还有即使降解也不会影响结果的办法。

小憨

culturelily 发表于 2015-7-8 09:42
可以讲讲如何避免串联染料降解，比如如何发现降解，还有即使降解也不会影响结果的办法。 ...

其实避免降解的办法也就是低温、避光、少量分装。
荧光染料降解其实最大的影响不是荧光信号减弱，而是假阳性，比如PE-Cy7降解以后就变成了PE，在PE通道就会有假阳性信号出来，这是最致命的缺陷。
好在一般的抗体只要不强光照，待用的时候放冰上，基本也不怎么降解，小包装的直接使用，大包装的分装后再使用，注意这几点也就行了。
以上是我自己的经验，请高手们指正~

niwanmao

culturelily 发表于 2015-7-8 09:42
可以讲讲如何避免串联染料降解，比如如何发现降解，还有即使降解也不会影响结果的办法。 ...

一个是避光，另一个尽量保持温度稳定，不要变化幅度过大。
发现降解的方法就尽量使用一个单染的标本，观察单分子通道是否出现明显的荧光。