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[结构和原理] PE-CY5染色问题

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发表于 2015-8-5 09:25:28 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏2流星未解决
请问各位一个PE-CY5染色问题,我们培养的T细胞,用CD62L-PE CY5染单阳管,调补偿的时与第三通道的补偿怎么也调不好,单峰图也显示没有峰,请问大家有没有遇到过这种情况,我们实验室其他流式抗体,只要是PE-CY5的都有调补偿调不好的问题,但是机器质控都没有问题,请教大家这是怎么回事?谢谢~

CD62L .jpg
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发表于 2015-8-5 11:32:06 | 显示全部楼层
pe-cy5    也是FL-3
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 楼主| 发表于 2015-8-5 12:54:39 | 显示全部楼层
呃,捉急,写错了,是和第四通道,补偿调不好
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发表于 2015-8-5 13:33:50 | 显示全部楼层
宅在火星 发表于 2015-8-5 12:54
呃,捉急,写错了,是和第四通道,补偿调不好

是和APC通道的补偿是吗?反正APC和PE/Cy5最好别一起用,补偿太大了,换PerCP/Cy5.5吧
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发表于 2015-8-5 15:53:37 | 显示全部楼层
这似乎不是补偿调不好的问题了,感觉太怪了,补偿调不好也不是这样的图形啊。S形的
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 楼主| 发表于 2015-8-5 16:29:37 | 显示全部楼层
是PE-CY5和APC通道的补偿,买的时候没意识到它俩太相近了,结果补偿怎么也调不好,跑成这样也太奇怪了,而且单峰图也是“趴”成一片,根本没有峰,有没有试剂和机器的问题?我们是BD Calibur的
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发表于 2015-8-5 19:59:09 | 显示全部楼层
宅在火星 发表于 2015-8-5 16:29
是PE-CY5和APC通道的补偿,买的时候没意识到它俩太相近了,结果补偿怎么也调不好,跑成这样也太奇怪了,而 ...

我知道是calibur,即使两者因为荧光光谱重叠,需要增加很大的补偿似乎也不会造成这种歪七扭八的形状,你这里是调节了多大的补偿?
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 楼主| 发表于 2015-8-6 12:21:43 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-8-5 19:59
我知道是calibur,即使两者因为荧光光谱重叠,需要增加很大的补偿似乎也不会造成这种歪七扭八的形状,你 ...

补偿从0~99%,几乎没有什么太大变化
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发表于 2015-8-6 19:48:18 | 显示全部楼层
宅在火星 发表于 2015-8-6 12:21
补偿从0~99%,几乎没有什么太大变化

如果调节补偿没有变化,那么更加肯定不是补偿问题了,而是一些异常的电子信号,结果不对的。不知道你这群R1的比例多少?FSC和SSC比平时其它情况下有没有变动很大?
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