CD45/SSC散点图原始细胞区域都“生活”着哪些种类的细胞？

niwanmao

CD45/SSC散点图，是我们在做白血病免疫分型时最常用的散点图，有人喜欢用SSC-Log，有人喜欢用SSC-Lin，没有好坏之分，习惯使然，但我个人更喜欢用SSC-Log，因为原始区域在这种模式下能够区分得更清楚。

一开始认识CD45/SSC散点图的时候，我们都会教新手，先认识好粒系、单核系、淋系的位置，最下方是红系和碎片，四者包围的区域就是原始细胞区域。新手了然。但是等到新手成长后，千万要记得告诉他/她，原始细胞区域“生活”着很多种细胞。

见下图：


红色——原始细胞，一般可用CD34、CD117等标记区分。
紫色——嗜碱粒细胞，CD34－CD123高表达HLA-DR阴性。
水蓝色——浆样树突状细胞，CD34－CD123高表达，但与嗜碱粒细胞不同的是，HLA-DR阳性。
此外，还夹杂着一些SSC减小的粒细胞、幼稚单核细胞、早期和中期B淋巴细胞等。

所以，这也是我们为什么在白血病免疫分型要做那么多标记的原因^_^

shaner-ok

是的，原始细胞区不简单啊！

jieam2007

倪老师，您好，我要测有核红细胞的凋亡，请问使用CD45/SSC标记有核红细胞呢？还是用CD71/SSC or FSC标记啊？流式新手，请老师指点，十分感谢{:soso_e156:}

niwanmao

jieam2007 发表于 2015-11-11 09:44
倪老师，您好，我要测有核红细胞的凋亡，请问使用CD45/SSC标记有核红细胞呢？还是用CD71/SSC or FSC标记啊 ...

CD71，FSC/SSC均设置成LOG。

jieam2007

知道了，谢谢倪老师！我再试试

jieam2007

倪老师您好，实验搁置了一段时间，再次询问您相同的问题，我要检测有核红细胞，可以直接把CD45/SSC散点图中CD45阴性的那一团细胞作为目的细胞吗？还是要先选择CD45阴性细胞，然后再用CD71来圈门呢？谢谢倪老师！

niwanmao

jieam2007 发表于 2016-2-19 10:51
倪老师您好，实验搁置了一段时间，再次询问您相同的问题，我要检测有核红细胞，可以直接把CD45/SSC散点图中 ...

最好再加CD71，因为CD45阴性里面会存在较多碎片或非特异性染色。

jieam2007

好的，知道了，谢谢倪老师！

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2015-11-11 10:36
CD71，FSC/SSC均设置成LOG。

请教一下老师，如果再加上gpa标记的话，是否就可以全血（无需淋巴细胞分离液处理，不裂红）同时分析成熟红细胞（gpa+annexin v）和网织红细胞（cd71+annexin v）的凋亡情况？可以的话fsc和ssc都调整成log模式（还是调整成线性模式）

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2016-5-19 11:19
请教一下老师，如果再加上gpa标记的话，是否就可以全血（无需淋巴细胞分离液处理，不裂红）同时分析成熟 ...

CD71不是网织红特有的标记，网织红还是需要噻唑橙染色，通过RNA的含量来区分的。
如果要做，FSC和SSC都是需要用LOG的。
区分有核红和成熟红，还是用CD36、CD45两个指标更好。