流式细胞仪如何检测NK细胞活性，如何圈门？

xuexuqiong

各位老师，我是新手，之前完全没接触过流式细胞仪。我传了两张图想让各位老师帮忙看看我圈的门对吗，不对该怎么改？
我的工作是培养细胞，想看一下Nk细胞的活性，用的是BD的CD3FITC，CD16+CD56PE的抗体，仪器是艾森ACEA NovoCyte。

第一张图是没有加抗体的，第二张图是加了抗体的。

1

2

niwanmao

FSC/SSC散点图圈小一点，然后把第二个图的SSC用工具栏上的放大按钮放大，否则CD3圈起来都看不到，这样你最后的CD3/CD56CD16的散点图十字门就好设了，不会出现这么多非特异性染色。

chymanhz

好像补偿也没做好，把文件发上来帮你整理一下

xuexuqiong

chymanhz 发表于 2015-8-6 22:22
好像补偿也没做好，把文件发上来帮你整理一下

老师，不好意思，这几天太忙了，现在才有空把文件传上来，这是我最近做的，麻烦您给看一下，谢谢

xuexuqiong

niwanmao 发表于 2015-8-6 20:07
FSC/SSC散点图圈小一点，然后把第二个图的SSC用工具栏上的放大按钮放大，否则CD3圈起来都看不到，这样你最 ...

老师，我还想问一下，那个固定细胞是在标抗体前还是标完抗体再固定？

chymanhz

xuexuqiong 发表于 2015-8-11 15:54
老师，不好意思，这几天太忙了，现在才有空把文件传上来，这是我最近做的，麻烦您给看一下，谢谢
...

今天不知道为什么下载不下来，我明天再试试

chymanhz

xuexuqiong 发表于 2015-8-11 15:54
老师，不好意思，这几天太忙了，现在才有空把文件传上来，这是我最近做的，麻烦您给看一下，谢谢
...

今天不知道为什么下载不下来，我明天再试试

niwanmao

xuexuqiong 发表于 2015-8-11 15:57
老师，我还想问一下，那个固定细胞是在标抗体前还是标完抗体再固定？

最好标完后直接上机检测。实在没法及时做，可标记完固定。

xuexuqiong

niwanmao 发表于 2015-8-11 21:41
最好标完后直接上机检测。实在没法及时做，可标记完固定。

好的，谢谢老师

xuexuqiong

chymanhz 发表于 2015-8-11 21:07
今天不知道为什么下载不下来，我明天再试试

嗯嗯，麻烦老师了，非常感谢