ThT17,Th1分析求助

tangrbsoon · 发表于 2015-8-7 11:43:08

做的小鼠脾脏或淋巴结细胞的流式，进行CD4+细胞中IL-17和IFN-r染色，但IL-17或IFN-r分群不明显，表达不够，但两者双阳性的区域很奇怪，
图感觉不对劲，请帮忙看看是什么原因。谢谢。

QQ图片20150807114825.png

niwanmao · 发表于 2015-8-7 21:50:11

这种对角线一般都是非特异性染色，可能是死细胞引起。所以对于这类实验，加个死活细胞鉴别染料很有必要。

tangrbsoon · 发表于 2015-8-8 10:26:06

但是我这是gate了CD4以后的图，CD4 positive的cell也可能是死细胞吗？
另外，倪老师，我想咨询一个问题，比如我做IL-17 PE时，荧光调节补偿的单色对照是选用CD4 PE这类表达高的，还是IL-17 PE本身呢？谢谢！

niwanmao · 发表于 2015-8-8 11:06:52

tangrbsoon 发表于 2015-8-8 10:26
但是我这是gate了CD4以后的图，CD4 positive的cell也可能是死细胞吗？
另外，倪老师，我想咨询一个问题，比 ...

死细胞什么抗体都可以染上。可不要小看死细胞，死都死了还怕啥：）

bimawenlaile · 发表于 2015-8-8 16:21:30

除了死细胞染上了，还有一点就是FITC和PE荧光补偿非常明显，这图补偿不够导致这种图形，如果能把IFN换成APC荧光，结果会好很多

tangrbsoon · 发表于 2015-8-9 11:31:52

bimawenlaile 发表于 2015-8-8 16:21
除了死细胞染上了，还有一点就是FITC和PE荧光补偿非常明显，这图补偿不够导致这种图形，如果能把IFN换成APC ...

谢谢。
我们实验室暂时没有IFN APC，可以通过改变PE为别的颜色吗？

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[淋巴细胞相关] ThT17,Th1分析求助