流式检测前样品如何处？

gxdxhot

老师你好，我是新手，对流式不是很了解。请教几个问题，我的流式样品处理顺序是这样的：样品PBS清洗2次--PBS重悬--分管加抗体--避光4度孵育20min--离心弃上清--PBS重悬细胞--上机检测。

问题：1.加抗体后在什么条件下孵育最好（T细胞）？
          2.上机检测前需要洗一次吗？对结果有没有影响？

niwanmao

1、抗体孵育可以在室温，但必须要避光。
2、抗体孵育后、上机前必须要洗涤，否则容易出现非特异性染色。