流式分析外小鼠周血中性粒细胞，单核细胞亚群问题

overmind0571

求助版内大神，这是小弟做的小鼠外周血单核细胞亚群的分析，其中FITC-Ly6G+和APC-CD11b+为中性粒，Ly6G-和PerCP5.5-Ly6Chigh/low为单核细胞亚群，有几个问题想请教下：
1.为何CD11b的阳性象限那么偏左,是因为抗体浓度么（我1：500）？
2.这种做法需要加lin-筛选么？
3.为何我的细胞分群都不是很明显呢（P6，P7）
实在是谢谢各位了

niwanmao

1、CD11b APC荧光强度太弱，跟抗体用量不足有关。
2、所谓LIN是多种系列特异性抗体混合组成，针对的是那些非B非T非NK非粒非单核的细胞，你这个单核细胞有特异性标记，没有必要。
3、P6、P7如果觉得区分不清，可尝试用一下密度图或等高线图，会比较清楚。

overmind0571

niwanmao 发表于 2015-9-23 20:25
1、CD11b APC荧光强度太弱，跟抗体用量不足有关。
2、所谓LIN是多种系列特异性抗体混合组成，针对的是那些 ...

实在太谢谢老师了

robert1988

1:500太夸张，我们平时都1:50-1:200, 200一般是高表达且之前用过很亮的抗体。

mybiosciences

小鼠的不要忘记用Fc受体阻断剂CD16/32

Veblen

想问一下老师，一般中性粒细胞如果要用marker来鉴定的话，是不是就是Ly6g和CD11b双阳的细胞就是（通用）？

niwanmao

Veblen 发表于 2019-2-11 17:47
想问一下老师，一般中性粒细胞如果要用marker来鉴定的话，是不是就是Ly6g和CD11b双阳的细胞就是（通用）？ ...

请看这篇：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6502-1-1.html