fsc，scc结果图反映的是细胞状态，为什么检测不到细胞呢

果子冻金津 · 发表于 2015-10-1 13:42:37

想请问大家关于流式检测方面的问题，最近我在做BMDC方面的实验，用流式检测DC的分化程度。很奇怪的是在FSC,SSC这张图里显示的细胞点就非常少，检测界面里也显示通过检测仪的events也非常少，但是检测之前是有肉眼可见的细胞饼的。FSC,SSC 这张图不是主要反映细胞状态的吗？为什么在细胞数量很多的情况下通过检测器的细胞如此的少呢？希望有懂的朋友不吝赐教，谢谢大家了。

yaolinjuan1989 · 发表于 2015-10-1 20:54:35

是不是仪器堵了？有些细胞太多的话，一下子就堵死了

果子冻金津 · 发表于 2015-10-2 09:01:02

试过重新清洗机器后再检测，发现之前是几十个细胞，清洗后也就两百多个

小憨 · 发表于 2015-10-2 10:55:05

除了以上两位老师说的外，还有可能是电压调的实在是太高或太低，同样跟堵了一样收不到几个细胞

niwanmao · 发表于 2015-10-2 14:42:38

建议：
首先明确你上机的时候管子里面的细胞密度，是否真的多？
其次，确定液路是否通畅。

果子冻金津 · 发表于 2015-10-2 15:10:20

因为加完抗体后想尽快检测就没有进行细胞计数，但是在检测之前确实是有肉眼可见且较大的细胞饼。其次老师液路通畅与否我还真不知道应该从哪里能得到确认，上次检测出现问题后重新清洗了仪器，但问题还是没有得到解决。

niwanmao · 发表于 2015-10-2 19:04:35

果子冻金津发表于 2015-10-2 15:10
因为加完抗体后想尽快检测就没有进行细胞计数，但是在检测之前确实是有肉眼可见且较大的细胞饼。其次老师液 ...

细胞饼？那是啥玩意儿。我建议你下次上机前可以先用玻片观察一下形态，确认一下自己的细胞量确实是够的。
此外，从你前面描述的冲洗之后获取的细胞量增加几倍，我考虑机器液路还是存在堵塞的。所以两方面因素都要考虑。

果子冻金津 · 发表于 2015-10-3 10:10:01

我这里说得太随意了，细胞饼是离心后得到的细胞沉淀。昨天又重复做了一次，这回就正常了，我觉得可能是当时仪器通路出现问题了吧，想请问老师在这种发现液路可能堵塞，清洗一次后还不能完全改善的情况下，应该怎么处理呢？

niwanmao · 发表于 2015-10-3 17:05:23

果子冻金津发表于 2015-10-3 10:10
我这里说得太随意了，细胞饼是离心后得到的细胞沉淀。昨天又重复做了一次，这回就正常了，我觉得可能是当时 ...

有时候如果堵塞严重，不一定可以一次就冲得通，需要多次冲洗或者大冲洗。

家的感觉 · 发表于 2015-10-4 07:36:57

有的仪器就是容易堵塞，不过有时候也可能是进样针堵了，我以前遇到过

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