Alexa Fluor 647 Rat anti-human CXCR5 抗体滴定

PeteM · 发表于 2015-10-27 13:59:52

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@niwanmao 倪老师，您好，首先我是个流式菜鸟，最近需要做PBMC，检测了这个抗体：Alexa Fluor 647 Rat anti-human CXCR5，由于CXCR5 主要在B细胞上表达，那么是否在抗体滴定的时候是否要加上其他marker？由于我们这个panel主要是来分型T 细胞，因此我们做了如下实验:
共检测了两管：
CD45RA+ CD4+
AF 647 CXCR5 1:50

CD45RA+ CD4+
AF 647 CXCR5 1:100

请问这样的结果是否能告诉我们哪种浓度更适合实验？谢谢！！

niwanmao · 发表于 2015-10-27 20:48:53

肉眼看差不多，你应该计算信噪比或染色指数的。

爱白衣杀手 · 发表于 2015-11-5 09:15:54

这是要做Tfh吧。滴定我理解是滴定抗体和抗原结合的能力，无论是B，还是T细胞的CXCR5都是一样的，所以不用区分T还是B。只要单染滴定就行。

PeteM · 发表于 2015-11-20 12:21:13

爱白衣杀手发表于 2015-11-5 09:15
这是要做Tfh吧。滴定我理解是滴定抗体和抗原结合的能力，无论是B，还是T细胞的CXCR5都是一样的，所以不用区 ...

好的，谢谢老师

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