T细胞亚群能否只用表面标记来区分？

味海医心

做了一段时间的流式，把Treg从CD4+CD25highFoxP3+改到CD4+CD25highCD127low/dim后，因为不用固定、破膜，感觉淋巴细胞分群明显，终于看到了传说中的3群细胞，另外，CD4和CD8的分群也变清楚了。考虑到偶联染料对甲醛和温度都比较敏感，做多色的时候，我个人比较倾向于做表面的标记。那么现在想请教各位大牛，好像大家做Th细胞亚群喜欢用细胞因子或转录因子，像Th1用IFN-γ/T-bet，Th2用IL-4，Th17用IL-17a/RORγt等，很少有看到仅用表面标记，比如Th1用CD4+CXCR3+，Th17用CD4+CCDR6+这样的，请问是为什么？可不可以只用表面标记呢？

aninawang

1. 很少单独使用表面标记的原因是,很少表面标记是特异和排他性的,单独使用表面标记不一定能获得认可,这与细胞亚群的定义有关系,比如Th17,是一群分泌IL-17的CD4+T细胞亚群,如果想用表面标记代替,必须是获得认可的组合才行,否则会受到质疑.像Treg的表面标记已获得广泛认同,你使用是不会存在问题的.
2.有时候功能实验,为了保存细胞的活性不能标记保内细胞因子或转录因子的时候,可以选择比较公认的表面标记代替,最好能证明表面标记的细胞和胞内标记的细胞是一群细胞或是较大的重合性.
希望有所帮助.

niwanmao

其实也是承认的，只是胞内的标记在科研实验中用得比较多，而临床上为了效率起见，大多用表面标记。

W3YC

老师 求问您做过CD8+的Treg吗？ 人外周血检测CD8+Treg，咱们一般默认检测Treg是CD4+的，那么有没有必要检测CD8+的Treg呢

niwanmao

W3YC 发表于 2023-4-17 16:16
老师 求问您做过CD8+的Treg吗？ 人外周血检测CD8+Treg，咱们一般默认检测Treg是CD4+的，那么有没有必要检测 ...

我没做过。
但我觉得有必要去测的。

yxyyjs

这个怎什么说呢，哎，别冲动，如果不做胞内表达的mark，文章外审完修回来肯定会让补的，无悬念……

W3YC

yxyyjs 发表于 2023-4-18 17:06
这个怎什么说呢，哎，别冲动，如果不做胞内表达的mark，文章外审完修回来肯定会让补的，无悬念…… ...

如果不做FOXP3一定会让补吗？ 我在买抗体 不打算买FOXP3，因为破膜好麻烦

W3YC

niwanmao 发表于 2023-4-18 08:33
我没做过。
但我觉得有必要去测的。

谢谢倪老师！不打算买CD8+Treg的抗体了，太麻烦了

yxyyjs

W3YC 发表于 2023-4-18 18:58
如果不做FOXP3一定会让补吗？ 我在买抗体 不打算买FOXP3，因为破膜好麻烦 ...

你都已经做到CD4+CD25highCD127low/dim了，foxp3不做也应该没事的吧，另外固定皮膜液都有现成的产品可以买来，多几步离心而已，也不算太麻烦