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[流式相关软件] 我应该用百分比还是荧光强度?

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发表于 2016-1-5 11:59:32 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
给位老师、朋友:做了一个关于癌细胞吞噬的实验,数据结果如下(使用WinMDI 2.9分析的),根据实验,有峰的平均荧光强度值就可以,但有问题如下:1、数据中的14.4%指的是什么?
2、有老师告诉我说,有的文献,好像也有用百分比来表示荧光强度,请问这个该怎么理解,平均荧光强度不应该是数值吗?谢谢各位!

吞噬处理图片.jpg
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发表于 2016-1-5 19:30:22 | 显示全部楼层
1、图中的14.4%指的是你选中的这部分细胞占总数的比例。
2、我不知道你检测的目的是什么,是不是将癌细胞标记之后,用单核巨噬细胞吞噬?如果是的话,我建议用百分比来表示吞噬效果,不是说用百分比表示荧光强度,这两个概念你混淆掉了。
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发表于 2016-1-6 22:36:06 | 显示全部楼层
看样子明显有阴阳两群细胞啊!如果是用的荧光微球做的吞噬实验的话(一般是这样)那就应该选择右边那群细胞,表示有吞噬微球的(所以荧光通道显示是阳性的)。不过你这里只有一张图不好说,应该至少有一张阴性对照,看看没有吞噬的细胞是什么样子。

其实也不能直接说荧光强度或者使用百分比,要看实际情况。
1. 如果你的目的细胞只有一部分具有吞噬功能的话,你要看吞噬率,应该就看右边阳性峰的百分率。
2. 如果你的目的细胞全部都有吞噬功能的话(还是有这种可能性的,虽然不多),你要看看他们吞的多少有没有区别,这个时候就应该看荧光强度。如果你的流式细胞仪分辨率足够好,你甚至可以看见分别吞了1个、2个、3个……微球细胞形成的单独的峰。
3. 如果你要1、2同时做,就是既要看有多少细胞吞了,又要看吞的细胞谁吞的多,就要两个一起看,既要看阳性峰的比例,又要看阳性峰的荧光强度。当然我强调了是“阳性峰”。

但是不管哪种情况,你图上这个门都是完全错误的,这个门应该划在两个峰之间。下面给你个CytoFLEX的APP NOTE参考一下。


2016-1-6 22-34-49.jpg
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参与人数 1流星 +5 收起 理由
niwanmao + 5 周老师一出手,总是大料

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 楼主| 发表于 2016-1-7 07:51:05 | 显示全部楼层
非常感谢给位老师的帮助,具体问题我再仔细思考下!再次感谢!
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发表于 2016-1-8 08:23:17 | 显示全部楼层
学习了!前天还在和同学讨论荧光强度和这个百分率是什么来着...
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