小鼠脾脏Tregs检测

liwj2013

请教各位大牛，这是我用裂红提取小鼠脾脏淋巴细胞后上流式的结果，我有几个问题想不明白：1：怎样判断死细胞，细胞碎片，细胞活性？2、淋巴细胞要圈哪一群？3.为什么我的CD25染色不强，是抗体的原因吗？4、全抗体的那管为什么CD25+Foxp3+双阳性的细胞那么少呢？
  第一次做，很多问题不懂

niwanmao

前面两个问题已经回答很多遍了，不知道为什么大家都不喜欢搜索一下站内的内容。

后面两个问题刚刚前面几个站友也提过类似问题，CD25强不强不是关键，分得开就行，阳性细胞少首先要确认试剂有没有问题，尤其是破膜剂的问题。

zhuangrui911

niwanmao 发表于 2016-1-11 19:37
前面两个问题已经回答很多遍了，不知道为什么大家都不喜欢搜索一下站内的内容。

后面两个问题刚刚前面几个 ...

如果固定破膜延长时间，会对实验结果产生不利影响吗？

niwanmao

zhuangrui911 发表于 2016-6-20 23:12
如果固定破膜延长时间，会对实验结果产生不利影响吗？

适当延长可以，太长会导致太多非特异性染色，这里面的度很难把握，跟使用的破膜剂有关。

zhuangrui911

niwanmao 发表于 2016-6-21 08:18
适当延长可以，太长会导致太多非特异性染色，这里面的度很难把握，跟使用的破膜剂有关。 ...

能否帮忙看下这个帖子，谢谢！
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5233-1-1.html