流式细胞术检测隐球菌脑膜炎患者脑脊液的隐球菌数量

niwanmao

这是一篇发表在J. Clin. Microbiol.杂志2015年12月份刊上的文章，由英国、南非、美国三国研究人员完成，《Flow cytometry to assess CSF fungal burden in cryptococcal meningitis》，文章很短，但里面做的东西还是挺有意思。

HIV感染者由于辅助T细胞功能缺失，容易得隐球菌脑膜炎，为了评估隐球菌脑膜炎的严重程度，以及用两性霉素B治疗效果，所以需要监测患者脑脊液中的隐球菌数量。用常规培养法，费时，为此，作者想到用活性染料AQUA和CD45标记脑脊液中的细胞和隐球菌（如下图），a1中的FSC/SSC无法准确区分白细胞和隐球菌，结合CD45和AQUA活性染料，可分出CD45－AQUA－的活隐球菌、CD45＋AQUA－的活白细胞、CD45＋AQUA＋的死白细胞。最后，流式计数结果和培养结果之间相关系数为0.91。


［注：文章中的方案并不是隐球菌特异性的方案，只是用于已确诊为隐球菌感染患者的监测。］

全文参见：http://jcm.asm.org/content/early/2015/12/24/JCM.03002-15.full.pdf

huqing

有意思 我们现在也是想用IgA抗体染肠道菌群，分出coated-IgA bacteria，但是感觉好难

niwanmao

huqing 发表于 2020-2-5 22:22
有意思 我们现在也是想用IgA抗体染肠道菌群，分出coated-IgA bacteria，但是感觉好难 ...

是细菌分离难？还是染色难？

huqing

niwanmao 发表于 2020-2-6 05:25
是细菌分离难？还是染色难？

是染色难  我也是才进实验室  目前尝试了几种不同的IgA抗体希望可以把IgA+菌区分出来，但是始终区分得不是很好，下一步设想把这部分阳性菌分选出来，

niwanmao

huqing 发表于 2020-2-14 22:42
是染色难  我也是才进实验室  目前尝试了几种不同的IgA抗体希望可以把IgA+菌区分出来，但是始终区分得 ...

Fecal IgA flow cytometry and sorting of IgA+ and IgA− bacteria
Fecal homogenates were stained with PE-conjugated Anti-Mouse IgA (eBioscience clone mA-6E1) or PE-conjugated Anti-Human IgA (Miltenyi Biotec clone IS11-8E10) prior to flow cytometric analysis or MACS and FACS sorting.
（文献来源：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4174347/）

huqing

niwanmao 发表于 2020-2-15 07:46
Fecal IgA flow cytometry and sorting of IgA+ and IgA− bacteria
Fecal homogenates were stained with ...

我们大致上就是按照这篇做IBD的文章来尝试的，IgA+细菌4%左右，想完成下一步分离培养很难