关于DAPI试剂

那定 · 发表于 2016-2-18 23:02:19

刚买了一支DAPI，想区分一下活细胞和死细胞，目前只有BD cantoII这台机器，因为没有DAPI这个通道选项，不知道应该选哪个通道？另外，细胞表面和细胞内因子还同时标有FITC、PE和Percp这三个颜色，不知道是否可以与DAPI同时标记？

abcmax · 发表于 2016-2-19 12:51:12

DAPI 根本不能区分死活细胞，换种试剂区分

niwanmao · 发表于 2016-2-19 15:20:19

DAPI是紫外激发，在CantoII上不能用。
可以考虑用一些商业化死活染料，那些有APC荧光或紫光405激发的。

fuweichao · 发表于 2016-2-29 10:40:05

405nm激光也可以激发DAPI吧、。@niwanmao

niwanmao · 发表于 2016-2-29 14:49:07

fuweichao 发表于 2016-2-29 10:40
405nm激光也可以激发DAPI吧、。@niwanmao

不会啊，你用过？

chymanhz · 发表于 2016-3-1 09:36:30

405nm激发率大概5%，和375的70-80%不能比，但是也能看出来。我做过一次。

niwanmao · 发表于 2016-3-1 12:26:35

chymanhz 发表于 2016-3-1 09:36
405nm激发率大概5%，和375的70-80%不能比，但是也能看出来。我做过一次。

嗯，是的。荧光波长总是一个连续的范围，多少会有重叠，用低效率激光激发总不是正道。

chymanhz · 发表于 2016-3-2 10:25:25

niwanmao 发表于 2016-3-1 12:26
嗯，是的。荧光波长总是一个连续的范围，多少会有重叠，用低效率激光激发总不是正道。 ...

不过考虑到375，尤其355太贵，买个高功率的405nm偶尔做做也是可以的

didi_zhou · 发表于 2016-3-6 21:28:54

一般30mW以上的405就可以很好的激发DAPI了，很容易区分出死活，甚至是可以用DAPI做周期。功率可以补偿一些激发效果，也能获得很好的CV。

972676742 · 发表于 2016-9-29 09:49:36

niwanmao 发表于 2016-2-19 15:20
DAPI是紫外激发，在CantoII上不能用。
可以考虑用一些商业化死活染料，那些有APC荧光或紫光405激发的。 ...

倪老师，DAPI可以用来区分死活细胞吗？

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