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[标本处理] flow-fish的固定破膜

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发表于 2016-3-8 10:06:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
倪老师,不知道是否做过flow-fish这项技术,简单讲就是荧光标记的核苷酸探针通过原位杂交技术与胞内核苷酸碱基配对,用流式检测荧光,从而反映目标RNA的含量,原理上,应该是需要固定破膜。但是有文献讲用了多聚甲醛后直接就进行了杂交,所以请教的问题就是      一,是否说明多聚甲醛除了固定作用外,也有一定的增加膜通透性或者破膜的作用?国内有人说只用多聚甲醛胞内蛋可以染色(免疫组化技术),是否可靠?

      二,针对这项flow-fish技术,是否意味着固定后不能再标记细胞表面标志物?
     三,关于flow-fish的技术,您有什么看法?
    谢谢!

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发表于 2016-3-8 21:25:42 | 显示全部楼层
你说的检测RNA的技术那个应该是Affymetrix的flowRNA技术吧?http://www.flowcyto.cn/bbs/article-77-1.html

flow-FISH能测DNA,也能测RNA,但用在端粒DNA检测上特别多见,详见:http://www.nature.com/nprot/jour ... nprot.2006.263.html
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