naive T诱导iTreg

yangyang158658

yangyang158658

这是图2，不同的圈门。
请各位看看，我是诱导的iTreg,感觉细胞分两群， 这两个圈门哪一个是正确的？谢谢

niwanmao

yangyang158658 发表于 2016-3-14 22:53
这是图2，不同的圈门。
请各位看看，我是诱导的iTreg,感觉细胞分两群， 这两个圈门哪一个是正确的？谢谢 ...

应该图2 那样都圈。

暖希贤

niwanmao 发表于 2016-3-15 08:23
应该图2 那样都圈。

老师，如果这样两群细胞，破核膜后还是两群么？还是变成一群呢？谢谢老师

niwanmao

暖希贤 发表于 2016-5-1 21:14
老师，如果这样两群细胞，破核膜后还是两群么？还是变成一群呢？谢谢老师 ...

这里所谓的两群一群，我觉得只是物理学参数上的变化，例如有些细胞比较大，有些细胞比较小，只要他们在性质上是一致的，就OK了。

小憨

你先都圈上吧，然后反圈门在看是那群细胞

暖希贤

niwanmao 发表于 2016-5-2 10:30
这里所谓的两群一群，我觉得只是物理学参数上的变化，例如有些细胞比较大，有些细胞比较小，只要他们在性 ...

老师您好，我也是诱导的TREG细胞，图片中是CD4+T进行过核转染，然后诱导treg（刺激诱导2天时做的流式），细胞怎么会分成两群呢？是我破膜没破好的问题么？附件中是原始文件，哪一部分才是treg比例呢？我刚分选出来CD4+T的时候treg比例大约3%多,为什么刺激诱导两天比例还低了呢？还是我分析的不正确

niwanmao

暖希贤 发表于 2016-5-2 21:48
老师您好，我也是诱导的TREG细胞，图片中是CD4+T进行过核转染，然后诱导treg（刺激诱导2天时做的流式）， ...

从图上看就很明显，你取的时候细胞取光了或者液流不稳定，可通过Time坐标将不好的信号去掉。

暖希贤

niwanmao 发表于 2016-5-2 23:19
从图上看就很明显，你取的时候细胞取光了或者液流不稳定，可通过Time坐标将不好的信号去掉。 ...

老师能否帮忙分析一下做个示范？怎么通过Time坐标去掉呢？

Victorrwang

该群有可能是doublets，在acquire sample的时候你可以加上SSC-W,SSC-H两个参数。然后在数据处理时做一个singlets的gating