细胞压边

那定 · 发表于 2016-3-25 13:43:43

各位老师，本人最近检测一个细胞因子，有很多细胞压在边上，换成双指数显示后发现很多细胞荧光强度在0以下，这是表示什么意思？是因为抗体原因还是电压没调好什么的……还有就是因为是刺激处理过的PBMC，考虑刺激后会有细胞因子分泌（ssc增大），在设门的时候是应该按照图1圈B细胞，还是按照图2圈，请指教！

abcmax · 发表于 2016-3-25 17:26:36

SSC电压调的太低，可以高一点。PE电压有点高，可以再低一点

niwanmao · 发表于 2016-3-25 19:24:07

没关系的，可以用Biexp转换使负轴的信号显示出来。
如果考虑刺激后细胞增大，那么按图1圈比较好。

那定 · 发表于 2016-3-26 00:52:44

感谢倪老师解答，还有就是不明白细胞显示负的荧光强度是表示什么意思？是指的是没染上的细胞吗？

niwanmao · 发表于 2016-3-26 11:23:20

那定发表于 2016-3-26 00:52
感谢倪老师解答，还有就是不明白细胞显示负的荧光强度是表示什么意思？是指的是没染上的细胞吗？ ...

有细胞，也有可能是碎片，总之流式细胞仪的检测是希望将所有的荧光信号都检测进去，但由于能力限制，举个例子，某流式细胞仪能够检测1～10000荧光强度的信号，坐标默认显示也是如此，但如果你的细胞荧光信号在0.8，那么就会落在轴外，而在散点图上则显示为压轴信号。此时，双指数转换可通过数学算法，将这些信号显示到出来。

chymanhz · 发表于 2016-3-28 21:27:50

另外，如果有荧光补偿，那也会有负数出现，因为荧光补偿就是相减，补偿系数不是线性的，所以会出现负值。

只帆片影110 · 发表于 2016-4-7 16:23:55

PE和PerCP电压调小，FITC电压调大点

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[细胞因子检测] 细胞压边