倪老师，想请教您膜电位，ROS检测等多个问题

niwanmao

标题：倪老师，想请教您膜电位，ROS检测等多个问题

想请教您膜电位，ROS检测等多个问题

因为接触流式时间不长 看了不少您发的帖子 还是有不少问题。

您有QQ或者MSN么？方便的话我加您一下请教。

我的QQ：71671871

回答者：niwanmao

问题可以在这个帖子里面连续提问，就跟在论坛里面发帖子一样，这样可以让其它有类似问题的朋友也能够了解这方面的知识。

 

2009年8月12日 0:54

回答者：zhouyongbao[

流式细胞术检测细胞内活性氧的方法

史桂英  高飞  石学耕  汤雪明  

【摘要】：目的流式细胞术检测NB4和U93 7细胞内活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)的水平。　方法双氢罗丹明 12 3 (DHR)以不同的时间孵育细胞 ( 1、6、2 4h) ,DHR可被细胞内ROS氧化为罗丹明 12 3 ,通过流式细胞仪来检测细胞内罗丹明 12 3的荧光 ,同时设立阴性及阳性对照。　结果 1μmol/LDHR孵育细胞 ,1～ 2 4hNB4和U93 7细胞内的平均荧光强度分别从 19.2 0增加到 3 84 .3 8和 12 .3 1增加到 97.15。　结论适当延长DHR孵育时间可检测不同细胞系ROS基准水平的差异。

看看这篇文章，说的很清楚

2009年8月12日 0:54

meteor0

多谢，我做ROS的时候有两个峰，不知道对不对

niwanmao

多谢，我做ROS的时候有两个峰，不知道对不对
meteor0 发表于 2010-10-2 14:58

                               
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Effects of As2O3 and AA on intracellular ROS in HepG2 cells.

Effects of As2O3 and AA on intracellular ROS in HepG2 cells.  
Cells were treated with:
A, control (untreated);
B, 2.0 µmol/L As2O3;
C, 100 µmol/L AA;
D, 2.0 µmol/L As2O3+100 µmol/L AA;
E, 10 mmol/L NAC;
F, 2.0 µmol/L As2O3+10 mmol/L NAC;
G, 100 µmol/L AA+10 mmol/L NAC;
H, 2.0 µmol/L As2O3+100 µmol/L AA+10 mmol/L NAC for 24 h.  
Intracellular ROS were measured by flow cytometry using anoxidation-sensitive fluorescent probe, DCFH-DA, which is oxidized to DCF in the presence of ROS.  For improved illustration, a guidance line (real line) has been drawn through histograms to be compared.

参考文献全文见：Li JJ, Tang Q, Li Y, Hu BR, Ming ZY, Fu Q, Qian JQ, Xiang JZ. Role of oxidative stress in the apoptosis of hepatocellular carcinoma induced bycombination of arsenic trioxide and ascorbic acid.Acta Pharmacol Sin. 2006 Aug;27(8):1078-84