流式细胞学测凋亡相关问题

hy_ · 发表于 2016-4-21 21:27:09

想用Annexin V双染的方法测阿霉素作用后的细胞凋亡的实验，我这个荧光染料如何选择？选APC-Annexin V和 SYTOX Green可以吗？还是PE7AAD？还是其他？

niwanmao · 发表于 2016-4-23 21:36:45

APC-Annexin V和 SYTOX Green

hy_ · 发表于 2016-4-26 20:06:20

本帖最后由 hy_ 于 2016-4-26 20:08 编辑

niwanmao 发表于 2016-4-23 21:36
APC-Annexin V和 SYTOX Green

可能我阿霉素浓度小，上机试了下，做流式的老师说可以用PE-Annexin V和7AAD

niwanmao · 发表于 2016-4-26 20:09:55

hy_ 发表于 2016-4-26 20:06
可能我阿霉素浓度小，上机试了下，做流式的老师说可以用PE-Annexin V和7AAD ...

难道你的阿霉素对Annexin V－PE没有影响？还有，PE通道貌似对7－AAD也有干扰吧

hy_ · 发表于 2016-4-26 21:20:23

niwanmao 发表于 2016-4-26 20:09
难道你的阿霉素对Annexin V－PE没有影响？还有，PE通道貌似对7－AAD也有干扰吧 ...

上机检测显示没有影响，我们这凋亡有用PE和7AAD的，PE在2通道，7AAD在3通道吧；有想请教下阿霉素是用488nm的蓝色激光激发吧？

niwanmao · 发表于 2016-4-27 08:10:07

hy_ 发表于 2016-4-26 21:20
上机检测显示没有影响，我们这凋亡有用PE和7AAD的，PE在2通道，7AAD在3通道吧；有想请教下阿霉素是用488n ...

阿霉素的发射波长与PE是重叠的，而PE和7-AAD是有补偿的，所以阿霉素对这两者都影响。

bluelight007 · 发表于 2016-8-18 10:36:23

niwanmao 发表于 2016-4-27 08:10
阿霉素的发射波长与PE是重叠的，而PE和7-AAD是有补偿的，所以阿霉素对这两者都影响。 ...

如果是这样请问倪老师做阿霉素这个药物的凋亡的话是不是就只能用FITC单染看凋亡了？或者有没有别的探针可以替代？

niwanmao · 发表于 2016-8-18 11:34:59

bluelight007 发表于 2016-8-18 10:36
如果是这样请问倪老师做阿霉素这个药物的凋亡的话是不是就只能用FITC单染看凋亡了？或者有没有别的探 ...

用APC-Annexin V和 SYTOX Green组合试试会比较好一点。

bluelight007 · 发表于 2016-8-19 11:02:55

niwanmao 发表于 2016-8-18 11:34
用APC-Annexin V和 SYTOX Green组合试试会比较好一点。

那么如果检测线粒体膜电位有什么合适的方案么？采用JC-1或者TMRM检测的时候似乎都会受到一些干扰导致结果比较混乱，还请倪老师多多指教，谢谢！

niwanmao · 发表于 2016-8-19 13:41:53

bluelight007 发表于 2016-8-19 11:02
那么如果检测线粒体膜电位有什么合适的方案么？采用JC-1或者TMRM检测的时候似乎都会受到一些干扰导致结果 ...

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