凋亡和坏死

hy_ · 发表于 2016-4-26 20:03:41

用CCK8测定药物的IC50浓度，然而用相同的浓度，用流式测凋亡，凋亡率只用20-30左右，为什么会有这样的差别？
是不是因为该药物加大浓度走的是坏死途径，而凋亡途径没有呢？还是其它原因？

niwanmao · 发表于 2016-4-26 20:03:42

hy_ 发表于 2016-4-28 22:11
我是用96孔板做CCK8测了3次，测出IC50都很接近，你觉得不准的因素会在哪？我们没有用24、48做过。。。你 ...

@hy_ 主要是IC50测定的是细胞死亡，而死亡的细胞中，并非都是由于凋亡（AV+PI－）引起的，所以，如果两者之间相差甚大，我觉得你可以继续测一下PI＋的比例、自噬细胞的比例等等。

niwanmao · 发表于 2016-4-26 20:15:47

首先，确定凋亡比例检测和分析没有问题。如果确定没有问题，那么两者之间的差异就是你所说的原因。

hy_ · 发表于 2016-4-26 21:22:20

niwanmao 发表于 2016-4-26 20:15
首先，确定凋亡比例检测和分析没有问题。如果确定没有问题，那么两者之间的差异就是你所说的原因。 ...

好的，谢谢倪老师回复。

lkpo456 · 发表于 2016-4-28 09:57:53

这种情况我认为是你MTT做的不准，你用24孔或者48孔做MTT试试你就会发现你之前测得IC50偏小

hy_ · 发表于 2016-4-28 22:11:14

lkpo456 发表于 2016-4-28 09:57
这种情况我认为是你MTT做的不准，你用24孔或者48孔做MTT试试你就会发现你之前测得IC50偏小 ...

我是用96孔板做CCK8测了3次，测出IC50都很接近，你觉得不准的因素会在哪？我们没有用24、48做过。。。你用24孔和48孔测出更大的IC50值，后能在96孔能重复出吗？

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[结构和原理] 凋亡和坏死