同时监测MM患者的MRD和13类免疫细胞，会发生什么事？

niwanmao

这是4月26日Blood杂志上发表的一篇临床试验的文章，设计严谨，值得参考和学习。

研究对象：
162例老年MM患者，先进行9个疗程的VMP方案（硼替唑米、马法兰、强的松），再接着9个疗程来那度胺和低剂量地塞米松。

8色检测方案（在文中被称为第二代多色流式）：
CD45-PacB, CD138-OC515, CD38-FITC, CD56-PE, CD27-PerCPCy5.5,CD19-PECy7, CD117-APC, CD81-APCH7
获取细胞总数≥2×10E6白细胞，当克隆性浆细胞（即骨髓瘤细胞）<20个即认为MRD阴性。

而异常浆细胞的确定特点就是根据CD19、CD27、CD38、CD45和/或CD81的表达变化，以及CD56、CD117的异常表达，这些异常特征中至少要有两个表型异常才确定为克隆性浆细胞。
见下图，同时结合8个异常特征区分克隆性浆细胞，其准确性达到96％：




按照此分析方法，将老年MM患者分为三组：MRD阴性（<10E-5）、MRD≥10E-5且<10E-4、MRD≥10E-4。

有意思的是，这个方案还可以同时对其它细胞进行分析，这样在监测MRD的同时，还可分析这些相关的免疫细胞变化。这些细胞包括：
红细胞（        CD117+, CD38-/dim, CD45-/dim, SSClo）
髓系造血前体细胞（CD117+, CD38+, CD45dim, SSChi）
有核红细胞（CD45-, CD38-, SSClo）
肥大细胞（CD117bright, CD45dim）
嗜酸粒细胞（CD45bright, CD81bright, SSChi）
嗜碱粒细胞（CD38+, CD81-, CD45dim）
单核细胞（CD45+, CD38+,CD81+, SSCint）
中性粒细胞（CD45dim, CD81-, SSChi）
B细胞及其前体细胞（CD19+, CD45dim, CD38bright, CD27-）
纯真B细胞（CD19+, CD45+, CD38-/dim, CD27-）
记忆B细胞（CD19+, CD45+, CD38-/dim, CD27+）
NKT和NK细胞（CD45+, CD56+, CD19-, SSClo）
T细胞（CD45+,CD56-, CD19-, SSClo）

监测指标包括：
TTP（Time-to-progression）：从MRD检测开始至病情进展的时间
OS（Overall Survival）：从MRD检测到任何原因死亡的时间

结果：
从以下的生存曲线图中，很明显可以看出MRD阴性的老年MM患者，其TTP和OS与其它两组有显著统计学差异，而其它两组（MRD≥10E-5且<10E-4、MRD≥10E-4）之间则无统计学差异。



而对13类免疫细胞谱的分析，用统计学方法也归纳为3类，与MRD高低无关，发现C类患者的有核红细胞、B细胞前体数量增高，而纯真B和记忆B数量降低，这类患者的TTP和OS均较短，与MRD水平无关，见下图。




文献来源：《Paiva B, Cedena MT, Puig N, Arana P, Vidriales MB, Cordon L, Flores-Montero J, Gutierrez NC, Martín-Ramos ML, Martinez-Lopez J, Ocio EM, Hernandez MT, Teruel AI, Rosiñol L, Echeveste MA, Martinez R, Gironella M, Oriol A, Cabrera C, Martin J, Bargay J, Encinas C, Gonzalez Y, Van Dongen JJ, Orfao A, Bladé J, Mateos MV, Lahuerta JJ, San Miguel JF. Minimal residual disease monitoring and immune profiling using second generation flow cytometry in elderly multiple myeloma. Blood. 2016 Apr 26. pii: blood-2016-03-705319. [Epub ahead of print] PubMed PMID: 27118453.》