求助！ModFit分析细胞周期时样本堆在轴上。。。

shark41

仪器是BD FACSAria Ⅲ 软件是Diva6 用PI染色，流式上的结果没事，但是一到ModFit上就不行了。。。。
第一个门还好，第二个门的样本全部堆积在X轴或者Y轴上。。调过轴坐标还是不行，有人遇到过这种情况么。。求解答！


20160519.rar (1.1 MB, 下载次数: 10)

2016-5-23 07:46 上传

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燕仔zoe

flowJo显示出来也是有问题的，更改坐标轴后，可以显示，但是坐标轴的值和我平常做的不太一样，是不是你收细胞的时候PI选择的不是Linear的模式呢

niwanmao

FCS文件传上来看看。

燕仔zoe

modfit上有PE的选项么

niwanmao

燕仔zoe 发表于 2016-5-20 16:36
modfit上有PE的选项么

荧光通道对就行，有时候获取时他们可能没有改。

shark41

niwanmao 发表于 2016-5-20 10:41
FCS文件传上来看看。

您好，FCS文件已上传，麻烦您给看一下吧，谢谢

niwanmao

确实像@燕子zoe  站友所说的，在Flowjo中可以看出，PE-w的坐标是正确的，但PE-A的坐标不对，是不是获取的时候没有调好，我看原始数据里面PE通道是用LIN获取的。
我大致在Flowjo里这么调节了下，但总感觉不是很理想：

shark41

好像还真是这么个情况，我再去查查原始数据，谢谢燕仔、倪老师！

轩辕河图

shark41 发表于 2016-5-24 16:30
好像还真是这么个情况，我再去查查原始数据，谢谢燕仔、倪老师！

Diva6 软件在通道选择上应该可以直接定义PI吧？我用的是LSR Fortessa ，可以直接选择用线性的PI-W和PI-A坐标，效果不错的。

niwanmao

轩辕河图 发表于 2016-6-2 10:41
Diva6 软件在通道选择上应该可以直接定义PI吧？我用的是LSR Fortessa ，可以直接选择用线性的PI-W和PI-A ...

检测通道应该是一样的吧？