流式设门问题

dongleifly

哪位大神能帮忙解答一下，为什么阴性对照和样本检测之间设门会差这么大呢，感觉没法根据对照设门了。哪里出了问题呢？希望大神能帮忙解决下心中的疑问，谢谢！

Arcrain

楼主需要提供更详细的说明。
样本可能出了问题。

niwanmao

你是指上面这行不染色的十字门位置和下面样本十字门位置相差太大？不染色的叫空白对照，细胞状态如何？

dongleifly

倪老师，您好！是的，细胞状态应该没问题的，做了好几批都是这种现象，尤其是APC通道，每次都是偏的很高。每次空白对照和同型对照做出来结果是一样的。

niwanmao

dongleifly 发表于 2016-5-27 09:52
倪老师，您好！是的，细胞状态应该没问题的，做了好几批都是这种现象，尤其是APC通道，每次都是偏的很高。 ...

FSC/SSC散点图上，空白对照、同型对照、实验组有没有差别？另外，平时培养有没有加什么药物或处理因素

dongleifly

散点图上没有差别的，平时培养时就是加了IL-2，IFN-γ等一些刺激因子，其他没经过什么处理了

niwanmao

dongleifly 发表于 2016-5-27 13:49
散点图上没有差别的，平时培养时就是加了IL-2，IFN-γ等一些刺激因子，其他没经过什么处理了
...

空白对照和实验组的细胞种类、添加的细胞因子种类是不是都一样？

dongleifly

是的，所有细胞都是一样的

dongleifly

niwanmao 发表于 2016-5-27 22:44
空白对照和实验组的细胞种类、添加的细胞因子种类是不是都一样？

细胞和因子都是一样的，培养过程都是一样。

Arcrain

如果样本没问题的话，建议换台机器试试。可能是APC通道出问题了。