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用去污剂自制破膜剂，皂素、Tween-20、Triton-x哪个好？
我应该选择哪种方法破膜？
用哪种方法破膜，需根据你要标记的靶抗原和要求，例如如果你需要尽可能保持细胞形态和光散射特点，那么就需要选择对形态影响小的固定和破膜成份，并且要检测的靶分子位于胞浆还是胞核，也非常重要。
常用的破膜方法主要包括：（1）有机溶剂：例如甲醇、丙酮等，这类溶剂主要通过溶解膜脂质、凝结膜蛋白实现固定和破膜。
（2）去污剂：这类试剂可在胞膜上形成一个孔实现破膜。
每种去污剂的作用原理是什么？
皂素：选择性与细胞膜胆固醇作用，将胆固醇从细胞膜上移除，从而形成孔洞。
Triton-X和Tween-20：非选择性，同时与蛋白质、脂质作用形成孔洞，并有可能将蛋白质、脂质从细胞膜上移除。
不同去污剂的优点和缺点
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总体说来，皂素相对来说更温和，对保持细胞形态较好，但如果要检测核内抗原，还是需要用Triton-X和Tween-20。
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发表于 2016-5-30 20:58:43
发表于 2016-6-1 16:47:52
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