想做一个罕见病的淋巴细胞分析，求助

axiang4u

最近需要对一种罕见病病人外周血淋巴细胞（T、B、NK）进行流式分析，请问大神，如果大致做一下和正常人对比应该如何设计？

我的设计方案是：
T细胞 CD45+CD3+
上面圈门接着CD4+得到CD4+T，CD8+得到CD8+T

B细胞是CD3-CD19+
上面圈门接着CD5+，CD5-

NK细胞是 CD3-CD56+CD16+
区分一下 CD56dimCD16high和CD56brightCD16dim/neg

这样可以大致比较出这种疾病与正常人的差异吗？
另外，B细胞我看了一些文献，有点苦恼的是分类方法特别多，有检测原始B、记忆B、浆细胞的，有检测B1、B2、Breg的。我的这个方案倾向于检测B1和B2，但B1b又被模糊了，所以想请大家给指点一下，有不足的我立马改方案，谢谢大家。

niwanmao

是否能比较出来与正常人的差异，应该说得看这种疾病是否涉及到这几类免疫细胞的变化。如果涉及到，就应该有差异。

方案这样也可以的。我觉得最好CD45每管都加上用，用CD45/SSC(log)设门，你会发现很好区分淋巴细胞和单核细胞。否则有些病人的标本不一定分的好。

axiang4u

niwanmao 发表于 2016-6-2 12:32
是否能比较出来与正常人的差异，应该说得看这种疾病是否涉及到这几类免疫细胞的变化。如果涉及到，就应该有 ...

谢谢倪老师，这个疾病之前做过th17和treg，表达都异于正常人，现在需要我把其他淋巴细胞也做一下，看看是否也有变化。

niwanmao

axiang4u 发表于 2016-6-2 12:43
谢谢倪老师，这个疾病之前做过th17和treg，表达都异于正常人，现在需要我把其他淋巴细胞也做一下，看看是 ...

可以试试，做了才知道。即使结果是无变化，但你前面的Th17和Treg有异常，结合起来也可以进行理论上的发病机制推导。